沉默信息调节因子1与Toll样受体4信号通路在1-甲基-4-苯基-吡啶离子帕金森病细胞模型炎症反应中的作用

摘要

目的 探究沉默信息调节因子1（Sirt1）与Toll样受体4（TLR4）信号通路在1-甲基-4-苯基-吡啶离子（MPP⁺）帕金森病（PD）细胞模型炎症反应中的作用。方法 使用MPP⁺作用于SH-SY5Y细胞进行干预以构建PD细胞模型，使用白藜芦醇（RV）和EX527干预细胞模型中Sirt1的表达水平。将SH-SY5Y细胞分为对照组（control组）、模型组（MPP⁺组）、激活剂组（RV+MPP⁺组）、抑制剂组（EX527+MPP⁺组）置于高糖培养基中培养。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）进行MPP⁺、RV和EX527的细胞毒性检测，最终选用MPP⁺（0.75 mmol/L）、RV（20μmol/L）、EX527（80μmol/L）作为干预浓度，均培养48 h。采用蛋白质印迹法检测酪氨酸羟化酶（TH）、Sirt1、TLR4炎症相关蛋白的表达情况。采用酶联免疫吸附分析（ELISA）检测细胞上清液中白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。采用免疫荧光检测TH、Sirt1、TLR4以及相关炎症因子在细胞上的表达情况。结果 与control组相比，MPP⁺组TH、Sirt1表达降低，TLR4表达增高（P<0.05）；与MPP⁺组相比，RV+MPP⁺组TH、Sirt1表达增高，TLR4表达降低（P<0.05）;EX527+MPP⁺组TH、Sirt1表达较control组和RV+MPP⁺组降低，TLR4表达增高（P<0.05）。ELISA结果显示，MPP⁺组和EX527+MPP⁺组IL-1β、IL-6、TNF-α水平较control组和RV+MPP⁺组显著增高（P<0.05），与MPP⁺组比较，EX527+MPP⁺组IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平增高（P<0.05）。免疫荧光结果显示，与control组相比，MPP⁺组TH和Sirt1的表达水平减少，TLR4及炎症因子IL-1β、TNF-α的表达增高（P<0.01）；与MPP⁺组相比，RV+MPP⁺组TH、Sirt1的表达增高，TLR4、IL-1β及TNF-α的表达水平减少（P<0.01）；与MPP⁺组相比，EX527+MPP⁺组TH、Sirt1的表达水平降低，TLR4及炎症因子IL-1β、TNF-α的表达增高（P<0.01）。结论 Sirt1-TLR4信号通路与PD神经炎症反应过程有一定的相关性，可能在疾病的发生、发展中发挥了作用。

关键词

帕金森病 / 沉默信息调节因子1 / Toll样受体4 / 炎症反应 / 1-甲基-4-苯基-吡啶离子

基金资助

2021年度河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20210548); 2025年度河南省政府决策研究招标课题“河南康复作业治疗学人才培养的路径探索与实践研究”(2025JC093); 2024年度河南省医学科技攻关计划联合共建项目(LHGJ20240510); 河南省2025年科技发展计划河南省科技攻关项目(252102310279)