NAD⁺对顺铂所致毛细胞氧化应激损伤的拮抗作用及相关基因表达调控

摘要

目的 探究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide, NAD⁺）对顺铂（cisplatin, Cis）诱导耳毒性的拮抗效果和机制。方法 体外实验采用HEI-OC1细胞系和出生后3 d的C57BL/6J乳鼠耳蜗基底膜培养模型，评估NAD⁺对Cis毒性的拮抗作用；在体实验通过鼓室注射Cis和NAD⁺于C57BL/6J成年小鼠，并进行听觉脑干反应测试；采用转录组测序分析HEI-OC1细胞中Cis组与Cis⁺NAD⁺组之间的差异基因；定量聚合酶链式反应对关键基因进行验证。结果 NAD⁺能够显著提高HEI-OC1细胞在Cis处理下的细胞活力，并有效减少细胞凋亡。NAD⁺显著提高耳蜗毛细胞的存活率以及减少活性氧的产生，并有效拮抗Cis引起的听力损失。转录组分析结果显示，Cis+NAD⁺组中共有204个基因上调表达、214个基因下调表达，差异表达基因显著富集于“铂类药物抗药性”和“谷胱甘肽代谢”等信号通路，并且Gstm6和Gsta2与抗氧化应激、药物代谢和细胞保护相关的关键基因表达显著上调。结论 NAD⁺在一定程度上能够拮抗Cis引起的耳毒性，其机制可能与调控谷胱甘肽代谢通路从而拮抗氧化应激损伤有关，提示了NAD⁺具有一定的治疗潜力。

关键词

顺铂 / 毛细胞 / 基底膜 / 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 / 活性氧 / 氧化应激 / 听力障碍

基金资助

国家自然科学基金优秀青年科学基金（82322020）; 国家重点研发计划青年科学家项目（2023YFC2509800）