润目灵方激活LC3-ATG5自噬通路抑制炎症因子表达改善干眼大鼠眼表损伤的机制

摘要

目的 探讨润目灵方激活LC3-ATG5自噬通路并抑制炎症因子表达改善干眼大鼠眼表损伤的作用机制。方法 采用氢溴酸东莨菪碱皮下注射构建干眼模型，将60只SD大鼠随机分为空白对照、模型、润目灵方、自噬激活剂、自噬抑制剂及润目灵方联合自噬抑制剂干预组，每组各10只。通过角膜荧光素染色(corneal fluorescein staining,CFS)评分、泪膜破裂时间(tear break-up time,TBUT)、酚红棉线试验(phenol red tear test,PRTT)评估眼表功能; HE染色及透射电镜观察角膜病理与超微结构; RT-qPCR/Western blot检测自噬相关指标(LC3、ATG5、P62)及炎症因子(IL-1β、IL-18、TNF-α)的表达。统计学处理采用单因素方差分析或重复测量资料方差分析。结果 模型组较空白组TBUT缩短(P<0.001),CFS评分升高(P<0.001),PRTT减少(P<0.001)，角膜上皮细胞空泡化增加。润目灵方干预后显著恢复眼表稳态(TBUT,CFS和PRTT，均P<0.05)，电镜显示自噬小体数量较模型组增加。分子机制显示，润目灵方显著激活LC3-ATG5自噬通路，表现为上调LC3-Ⅱ/LC3-I比值(P<0.05)及ATG5表达(P<0.05)，同时显著抑制炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-18的表达(均P<0.05)。结论 润目灵方可有效改善干眼大鼠眼表炎症及损伤，其机制与激活LC3-ATG5自噬通路并抑制TNF-α、IL-1β、IL-18等炎症因子表达密切相关。

关键词

润目灵方 / 干眼 / 动物模型 / 自噬 / 炎症因子