ST2825通过调节小胶质细胞极化减轻脑缺血-再灌注损伤的研究

摘要

目的 研究ST2825对脑缺血-再灌注损伤小胶质细胞的作用。方法 处于对数生长期小鼠小胶质细胞BV2随机分为对照组（Con）、模型组（Mod）和ST2825低剂量处理组（ST2825L）、ST2825高剂量处理组（ST2825H），采用氧糖剥夺/再复氧（OGD/R）诱导缺血-再灌注模型，对细胞进行ST2825低剂量（5μmol/L）、高剂量（10μmol/L）处理。采用cell counting kit-8(CCK-8)方法检测活细胞数量，采用流式细胞术检测细胞活性氧（ROS）水平、凋亡及细胞极化状态，采用qPCR检测TNF-α、IL-10基因表达水平，采用免疫印迹（Western blotting）方法检测Caspase-1、cleaced Caspase-1、NLRP3、i NOS、IL-1及IL-18蛋白表达水平。结果 CCK-8显示，与Con组相比，OGD/R后Mod组细胞活力极显著降低（P<0.01）；与Mod组相比，ST2825L组、ST2825H组细胞活力显著升高；Mod组较Con组ROS水平增加，ST2825处理后ROS有所下降；与Con组相比，Mod组细胞凋亡率增加，ST2825处理后凋亡率较Mod降低，且呈剂量依赖性。与Con组相比，Mod组CD86表达显著增加，CD163表达降低，提示Mod组细胞向M1型细胞极化；与Mod组相比，两种剂量ST2825处理后CD86表达降低，CD163表达增加，提示ST2825促进缺氧复氧的BV2细胞向M2型细胞极化。qPCR显示，与Con组相比，Mod组细胞TNF-α表达增加，IL-10表达降低，ST2825L组和ST2825H组TNF-α表达相较于Mod组降低，IL-10升高。Western blotting显示，与Con相比，Mod组ARG1、Caspase-1和cleaced Caspase-1表达显著降低，NLRP3、i NOS、IL-1及IL-18表达增加，ST2825低剂量和高剂量处理后ARG1、Caspase-1和cleaced Caspase-1水平均显著增加，NLRP3、iNOS、IL-1及IL-18水平均降低。结论 ST2825通过调节小胶质细胞极化减轻脑缺血-再灌注损伤，降低氧化应激及炎症反应，这是减轻脑缺血-再灌注损伤的新途径。

关键词

ST2825 / 小胶质细胞 / 脑缺血-再灌注损伤 / 氧化应激 / 炎症反应 / 细胞凋亡 / 细胞极化 / 小鼠