miR-21靶向RASA1调节RAS-MAPK通路对子痫前期滋养层细胞功能的影响

摘要

目的 探讨微小RNA-21（miR-21）靶向Ras GTP酶活化蛋白1（ras GTPase-activating protein 1,RASA1）调节RAS-丝裂原活化蛋白激酶（RAS-mitogen-activated protein kinase,RAS-MAPK）通路对子痫前期（PE）滋养层细胞功能的影响。方法 收集2023年1月至12月在湖州市妇幼保健院治疗的40例PE患者和40例正常分娩孕妇的胎盘组织。RT-PCR检测PE患者和正常孕妇胎盘组织中miR-21和RASA1 mRNA表达水平；将滋养层HTR-8/SVneo细胞分为CK组、miR NC组、miR-21mimic组、miR-21mimic+oe-NC组、miR-21mimic+oe-RASA1组；RT-PCR检测各组HTR-8/SVneo细胞中miR-21和RASA1 mRNA表达水平；CCK-8实验检测细胞增殖情况；Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot检测细胞E-cadherin、N-cadherin、vimentin、Bax、Bcl-2、RASA1及RAS-MAPK通路相关蛋白的表达；验证miR-21与RASA1的靶向关系。结果 PE患者胎盘组织中miR-21表达水平显著低于正常孕妇胎盘组织，RASA1 mRNA表达水平显著高于正常孕妇胎盘组织（t值分别为24.393、15.917,P<0.001）。CK组、miR NC组、miR-21mimic组、miR-21mimic+oe-NC组、miR-21mimic+oe-RASA1组的HTR-8/SVneo细胞中miR-21和RASA1 mRNA表达水平比较，差异均有统计学意义（F值分别409.444、633.065,P<0.001）；五组HTR-8/SVneo细胞OD₄₅₀值（48h、72h）、迁移数、侵袭数、凋亡率比较，差异均有统计学意义（F值分别为32.074、29.428、70.934、103.170、71.849,P<0.001）；五组HTR-8/SVneo细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin、Bax、Bcl-2、RASA1蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（F值分别为50.597、92.860、57.177、48.272、90.235、55.249,P<0.001）；五组HTR-8/SVneo细胞中p-Raf/Raf、p-MEK/MEK和p-ERK/ERK蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（F值分别为100.931、87.709、75.244,P<0.001）。miR-21mimic+RASA1-WT组荧光素酶活性显著低于miR-NC+RASA1-WT组（q=22.570,P<0.05）。结论 miR-21可能通过下调RASA1来激活RAS-MAPK通路，进而促进HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和上皮间质转化，降低细胞凋亡率，改善滋养层细胞功能。

关键词

子痫前期 / 滋养层细胞功能 / 微小RNA-21 / Ras GTP酶活化蛋白1 / RAS-丝裂原活化蛋白激酶通路

基金资助

湖州市科技计划公益性应用研究项目（2022GYB07）