基于LDHA基因和Wnt/β-catenin信号通路探讨自噬在卵巢癌细胞侵袭和迁移及糖酵解中的作用

摘要

目的 探讨自噬通过调控乳酸脱氢酶A(LDHA)和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对卵巢癌细胞侵袭、迁移能力和糖酵解的影响。方法 2021年1月至2022年12月在空军军医大学西京医院使用厄尔平衡盐溶液(EBSS)饥饿处理诱导人卵巢腺癌细胞系SKOV3细胞诱导自噬。细胞实验分组1为：Control组、EBSS组和EBSS+3-MA组；细胞实验分组2为：EBSS+NC-shRNA组、EBSS+LDHA-shRNA1组和EBSS+LDHA-shRNA2组；细胞实验分组3为：EBSS+NC-shRNA组、EBSS+β-catenin-shRNA1组和EBSS+β-catenin-shRNA2组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法、Western blotting法、Transwell实验、细胞免疫荧光染色等检测并统计分析有关表达量的情况。结果 Control组和EBSS组及EBSS+3-MA组间细胞的微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达量相对比值比较，差异有统计学意义(F=113.900,P<0.01)。Control组和EBSS组及EBSS+3-MA组间细胞的侵袭和迁移细胞数及基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9蛋白相对表达量比较，差异均有统计学意义(F值分别为2 448.000、1 405.000、111.000、132.200,P<0.01)。Control组和EBSS组及EBSS+3-MA组间细胞的LDHA mRNA、GLUT1 mRNA、LDHA蛋白相对表达量比较，差异均有统计学意义(F值分别为311.400、66.940、154.200,P<0.01)。NC-shRNA组和LDHA-shRNA1组及LDHA-shRNA2组间细胞的LDHA蛋白相对表达量比较，差异有统计学意义(F=123.200,P<0.01)。Control组和EBSS组及EBSS+3-MA组间细胞的β-catenin、p-β-catenin磷酸化相对表达量比较，差异均有统计学意义(F值分别为206.500、222.200,P<0.01)。NC-shRNA组和β-catenin-shRNA1组及β-catenin-shRNA2组间细胞的β-catenin相对表达量比较，差异有统计学意义(F=127.000,P<0.01)。结论 饥饿诱导的自噬激活可促进卵巢癌的侵袭、迁移能力及糖酵解活性，其机制可能与自噬激活Wnt/β-catenin信号通路并上调LDHA表达有关。

关键词

卵巢癌 / 自噬 / 乳酸脱氢酶A / 糖酵解 / β-连环蛋白

基金资助

国家自然科学基金(81172458); 陕西省自然科学基础研究计划重点项目(2024JC-ZDXM-52)