槐耳多糖对宫颈癌CaSki细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的影响及其作用机制研究

陈良凤; 吕小慧; 王建; 马园园

中国妇幼健康研究 ›› 2025, Vol. 36 ›› Issue (11) : 15 -22.

陈良凤, 吕小慧, 王建, 马园园

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摘要

目的探讨槐耳多糖（HP）对宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法体外培养人正常宫颈上皮细胞HcerEpic及宫颈癌细胞CaSki，根据不同处理方法将CaSki分为Con组、HP-L组、HP-M组、HP-H组、pcDNA组、pcDNA-非受体型蛋白质酪氨酸磷酸酶9(PTPN9)组、HP-H+si-NC组、HP-H+si-PTPN9组。采用实时定量PCR(qRT-PCR)分析PTPN9在HcerEpic细胞及各组Caski细胞中的表达情况；利用甲基噻唑基四唑（MTT）法评估细胞增殖能力；通过克隆形成实验测定细胞克隆生成效率；应用流式细胞术检测细胞凋亡水平；划痕实验用于观察细胞迁移能力，Transwell小室实验则评估细胞的侵袭行为；Western blot技术用于检测细胞PTPN9、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase 3)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(cleaved-caaspase9)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平。结果与人正常宫颈上皮细胞HcerEpic相比，PTPN9mRNA、PTPN9蛋白在宫颈癌CaSki细胞中表达水平显著降低（t=18.665、9.758,P<0.05）；与Con组比较，细胞凋亡率、PTPN9mRNA、PTPN9蛋白、cleaved-caspase 3蛋白、cleaved-caspase 9蛋白表达水平在HP-L、HP-M、HP-H组显著升高，且HP-H组>HP-M组>HP-L组（F=114.333、104.110、45.244、101.093、88.405,P<0.05）,(24h、48h、72h)吸光度（OD）值、细胞克隆形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数、MMP-2蛋白、MMP-9蛋白水平在HP-L、HP-M、HP-H组显著降低，且HP-H组