生长分化因子-8通过调控性别决定区Y框蛋白2表达影响滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的研究

摘要

目的 探讨生长分化因子-8(GDF-8)在子痫前期(PE)产妇胎盘组织中的表达，并分析GDF-8通过调控性别决定区Y框蛋白2(SOX2)的表达影响滋养层细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制。方法 收集行剖宫产手术的PE产妇和正常产妇的胎盘组织，qRT-PCR法检测胎盘组织中GDF-8 mRNA表达。体外培养人绒毛膜滋养层细胞系HTR-8/SVneo细胞，将pcDNA-GDF-8、pcDNA-NC1、pcDNA-SOX2、pcDNA-NC2、pcDNA-GDF-8+si-SOX2和pcDNA-GDF-8+si-NC分别转染入细胞，用正常培养、不做转染处理的细胞作为对照。qRT-PCR法检测细胞中GDF-8和SOX2 mRNA的表达水平。CCK8法检测细胞增殖能力。EdU染色并计数实时增殖的活细胞数占比。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell小室实验测定细胞侵袭能力。Western blot法检测细胞中GDF-8、SOX2、增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白的表达水平。结果 与正常产妇比较，PE产妇胎盘组织中GDF-8 mRNA表达水平降低(t=35.174,P<0.001)。与pcDNA-NC1组比较，pcDNA-GDF-8组的HTR-8/SVneo细胞增殖能力、EdU染色阳性细胞占比、细胞划痕愈合率以及PCNA、Ki67、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达水平均升高，细胞侵袭数目增多(t=21.052、35.174、47.602、19.751、20.519、28.412、25.016、69.453,P<0.001);细胞中SOX2 mRNA和蛋白相对表达水平均升高(t=31.520、26.478,P<0.001)。与pcDNA-NC2组比较，pcDNA-SOX2组的HTR-8/SVneo细胞增殖能力、EdU染色阳性细胞占比、细胞划痕愈合率以及PCNA、Ki67、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达水平均升高，细胞侵袭数目增多(t=18.025、26.510、32.518、22.690、21.547、24.751、20.957、59.120,P<0.001)。与pcDNA-GDF-8+si-NC组比较，pcDNA-GDF-8+si-SOX2组的HTR-8/SVneo细胞增殖能力、EdU染色阳性细胞占比、细胞划痕愈合率以及PCNA、Ki67、MMP-2和MMP-9蛋白相对表达水平均降低，细胞侵袭数目减少(t=13.085、19.250、26.510、15.420、14.862、24.599、26.743、72.061,P<0.001)。结论 PE产妇胎盘组织中GDF-8表达降低，过表达GDF-8可能通过诱导SOX2表达促进滋养层细胞增殖、迁移和侵袭，从而影响PE的发生发展。

关键词

子痫前期 / 滋养层细胞 / 生长分化因子-8 / 性别决定区Y框蛋白2 / 增殖 / 迁移 / 侵袭

基金资助

湖南省卫生健康委科研计划项目(B202305016863)