RNA干扰受体相互作用蛋白激酶1基因表达对肾透明细胞癌生物活性的影响

摘要

目的 探讨受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)对肾透明细胞癌(ccRCC)生物功能的影响及机制。方法 通过RNA干扰技术降低RIPK1在ccRCC中的表达后，光镜观察细胞形态变化，CCK-8法检测细胞增殖变化情况，Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力的变化，流式细胞仪检测细胞发生凋亡、坏死水平，Western blot法检测cleaved caspase-3、混合谱系蛋白激酶样结构域(MLKL)和RIPK3表达变化。结果 小干扰RNA(siRNA)干扰48 h后，RIPK1-siRNA组细胞增殖吸光度值(0.563±0.042)低于NC-siRNA组(0.944±0.039;t=11.550,P=0.003);siRNA干扰72 h后，RIPK1-siRNA组吸光度值(0.408±0.019)低于NC-siRNA组(1.717±0.108;t=20.620,P<0.001)。与NC-siRNA组(72.000±12.120)比较，RIPK1-siRNA组(31.660±10.020)ccRCC细胞的迁移数量明显减少(t=4.442,P=0.011)。与NC-siRNA组(0.360±0.090、0.510±0.060、0.880±0.070)比较，RIPK1-siRNA组ccRCC细胞内cleaved caspase3、MLKL、RIPK3表达明显增加(0.780±0.070、1.490±0.100、1.680±0.130;t=6.380,P=0.003;t=8.656,P=0.001;t=14.150,P=0.001)。结论 RIPK1是ccRCC内调控细胞增殖、死亡及迁移能力的重要基因，抑制RIPK1能够促进ccRCC发生凋亡及坏死性凋亡。

关键词

肾透明细胞癌 / 受体相互作用蛋白激酶1 / 坏死性凋亡