敲低异常纺锤体样小头畸形相关蛋白诱导肝癌细胞凋亡的机制研究

摘要

目的 探讨异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(ASPM)在肝癌中的表达及其在调控肝癌细胞凋亡中的作用与潜在机制。方法 利用GEPIA和KM plotter在线分析ASPM在肝癌组织中的表达水平。利用小RNA干扰敲低肝癌细胞中ASPM的表达,采用流式细胞术、RT-PCR及Western blot技术检测敲低ASPM对肝癌细胞凋亡及DNA损伤相关凋亡信号通路的影响。结果 GEPIA分析显示,ASPM在肝细胞癌组织中的表达高于正常肝组织(F=447.612,P<0.001),KM Plotter分析显示ASPM表达与肝癌患者总体生存期及疾病无进展生存期均呈负相关(Z=3.528,P<0.001;Z=3.578,P<0.001)。流式细胞术结果显示ASPM敲低组肝癌细胞凋亡率高于对照组(t=8.672,P=0.001)。Western blot结果显示与对照组相比,ASPM敲低组ASPM及Bcl-2表达量均下调;γ-H2AX、磷酸化P53(Ser15)、Bax、cleaved caspase 9与cleaved caspase 3均上调。结论 敲低ASPM可诱发DNA损伤,通过激活P53经线粒体途径诱导肝癌细胞凋亡,靶向敲低ASPM有望成为肝癌治疗的潜在靶点。

关键词

异常纺锤体小头畸形相关蛋白基因 / 肝癌 / 细胞凋亡 / P53 / DNA损伤