ATF3对胃癌细胞焦亡及NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路的影响

摘要

目的 探讨转录激活因子3(ATF3)在胃癌细胞中的作用及相关机制。方法 人胃癌细胞系AGS、MKN45和HCG-27以及人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1培养后,实时荧光定量PCR检测ATF3 mRNA表达情况。AGS细胞分为Con组、OE-NC组、OE-ATF3组、si-NC组和si-ATF3组,CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术检测凋亡率,同时检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率、白介素-1β(IL-1β)和白介素-18(IL-18)水平,Western blot分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(Caspase-1)/焦孔素D(GSDMD)通路关键蛋白表达水平。结果 胃癌细胞系中ATF3 mRNA表达水平下调。与Con组和阴性对照组(OE-NC、si-NC)相比,OE-ATF3组细胞在48、72、96 h的增殖活力均受到抑制,细胞凋亡率升高,LDH释放量、IL-1β和IL-18的水平增加,NLRP3、Caspase-1的活化形式cleaved Caspase-1及焦亡执行蛋白GSDMD的剪切形式GSDMD-N的表达增加;si-ATF3组细胞的增殖能力增强,细胞凋亡率降低,LDH释放量、IL-1β和IL-18的水平降低,NLRP3、GSDMD-N、cleaved Caspase-1表达减少。结论 ATF3在胃癌细胞中表达降低,过表达ATF3可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路诱导焦亡有关。

关键词

胃癌 / 转录激活因子3 / 苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 / 焦亡 / 凋亡

基金资助

河南省医学科技攻关计划项目(LHGJ20240852)