替莫唑胺联合氟伏沙明通过信号转导与转录激活因子3通路对脑胶质瘤细胞增殖和转移的影响

摘要

目的 探讨替莫唑胺(TMZ)联合氟伏沙明(Flu)通过信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路对脑胶质瘤细胞的增殖和转移的影响。方法 将人脑胶质瘤细胞U251分为对照组、TMZ组、Flu组、联合用药组等4组，采用CCK-8法筛选TMZ和Flu对U251细胞适宜的药物浓度；用CCK-8实验、克隆形成实验检测单独及联合用药对细胞增殖的影响；用Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力；用流式细胞术分析细胞凋亡率；用荧光强度实验、蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Cleaved-Caspase3)、磷酸化STAT3与程序性死亡受体配体1(PD-L1)表达。结果 CCK-8实验、克隆形成实验显示，联合用药组细胞存活率、克隆形成数量均低于TMZ组、Flu组、对照组(P均<0.001);Transwell实验显示，联合用药组细胞侵袭、迁移数量均少于TMZ组、Flu组、对照组(P均<0.001);流式细胞术结果显示，联合用药组细胞凋亡率均高于TMZ组、Flu组、对照组(P均<0.001);Western blot结果显示，联合用药组促凋亡蛋白Bax、Cleaved-Caspase3表达均高于TMZ组、Flu组、对照组(P均<0.001),抗凋亡蛋白Bcl-2均低于TMZ组、Flu组、对照组(P均<0.001);荧光强度实验结果显示，联合用药组PD-L1平均荧光强度均低于TMZ组、Flu组、对照组(P均<0.001);Western blot结果表明，联合用药组磷酸化STAT3、PD-L1蛋白均低于TMZ组、Flu组、对照组(P均<0.001)。结论 TMZ联合Flu用药可通过阻断STAT3的磷酸化，抑制STAT3介导的PD-L1转录调控，下调U251细胞PD-L1表达，从而发挥抑制脑胶质瘤恶性发展的作用。

关键词

脑胶质瘤 / 替莫唑胺 / 氟伏沙明 / 信号转导与转录激活因子3信号通路 / 增殖

基金资助

合肥市第四人民医院院内科研项目(HFSY2023YB08)