乳腺癌三苯氧胺耐药MCF-7细胞模型的建立、优化及其耐药特性分析

摘要

目的 建立并优化三苯氧胺耐药的人乳腺癌MCF-7细胞模型，并分析其耐药特性。方法 选取MCF-7细胞株进行培养传代，采用10^-7、10^-6、10^-5 mol/L不同浓度三苯氧胺持续处理MCF-7亲本细胞，通过细胞增殖和形态学观察筛选最优诱导浓度；采用CCK-8法检测不同浓度三苯氧胺作用下亲本细胞及耐药细胞的活力变化，计算半数抑制浓度(IC₅₀);通过克隆形成实验验证耐药细胞株的表型稳定性。结果 通过细胞增殖情况筛选出10^-6 mol/L三苯氧胺处理下细胞增殖受抑制但仍维持较好贴壁状态，为最优诱导浓度。CCK-8实验表明MCF-7/TAM-R(10^-6 mol/L)细胞的IC₅₀值为8.55×10^-6 mol/L,高于MCF-7亲本细胞(4.00×10^-6 mol/L)、MCF-7/TAM-R(10^-7 mol/L)细胞(4.99×10^-6 mol/L)。克隆形成实验显示，在4.00×10^-6 mol/L三苯氧胺作用下，MCF-7/TAM-R(10^-6 mol/L)细胞克隆数目高于MCF-7亲本细胞、MCF-7/TAM-R(10^-7 mol/L)细胞，耐药表型稳定。结论 通过10^-6 mol/L三苯氧胺持续诱导成功建立了稳定耐药的MCF-7细胞模型，该模型具有显著且稳定的三苯氧胺耐药表型，可作为乳腺癌内分泌耐药机制研究及耐药逆转药物筛选的细胞模型。

关键词

乳腺癌 / 三苯氧胺 / 耐药细胞模型 / 细胞特性

基金资助

太仓市科技计划项目(TC2018JCYL15)