基于AMPK/mTOR信号通路探讨中药复方益糖康对db/db小鼠血脑屏障通透性及紧密连接蛋白的影响

摘要

目的 基于AMPK/mTOR信号通路，探讨中药复方益糖康对db/db小鼠血脑屏障通透性的影响及对紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的调控作用。方法 24只db/db小鼠随机分为模型组（db/db组）、利拉鲁肽组（LIRA组）以及益糖康组（YTK组），每组8只。另取8只db/m小鼠作为正常对照组（db/m组）。YTK组予以益糖康煎剂30 g·kg^-1·d^-1灌胃，LIRA组每日腹腔注射利拉鲁肽200μg·kg^-1·d^-1,db/m组和db/db组给予等量蒸馏水灌胃。实验期间，对小鼠空腹血糖和体质量进行观察。给药6周后，通过Morris水迷宫任务和旷场实验对小鼠进行行为学检测；随后对小鼠进行处死取材，采用Elisa检测小鼠血脂相关指标，EB法观察小鼠血脑屏障通透性，Western blot法检测小鼠脑组织中AMPK/mTOR信号通路、紧密连接蛋白Occludin、ZO-1蛋白的表达情况。结果 与db/m组比较，db/db组空腹血糖、血脂、体质量明显升高（P<0.05），逃避潜伏期和摸索距离显著增加，穿越次数和目标象限活动时间则明显减少，血脑屏障通透性明显增加（P<0.05），脑组织中AMPK、mTOR、Occludin、ZO-1蛋白的表达显著降低（P<0.05）；与db/db组比较，YTK组小鼠血糖、血脂、体质量明显升高显著降低（P<0.05），逃避潜伏期和摸索距离显著下降，穿越次数和目标象限活动时间则明显增加，血脑屏障通透性明显降低，脑组织中AMPK、mTOR、Occludin、ZO-1蛋白的表达显著降低显著上调（P<0.05）。结论 益糖康可能通过AMPK/mTOR信号通路，改善糖脂代谢情况，同时上调Occludin、ZO-1蛋白表达，从而保护BBB功能完整性，最终改善db/db小鼠认知功能障碍。

关键词

糖尿病 / 认知功能障碍 / 血脑屏障 / 益糖康 / Occludin / ZO-1