羟基红花黄色素A通过靶向MD2减轻LPS诱导的心肌损伤

摘要

目的 探讨羟基红花黄色素A(HSYA)能否通过靶向髓样分化蛋白2(MD2)减轻小鼠心肌细胞炎症损伤及细胞凋亡。方法 利用不同浓度的HSYA(0.1、1、10μmol/L)预处理小鼠心室肌细胞2 h,脂多糖(LPS)(5μg/m L)干预4 h后进行检测,进一步通过分子对接技术明确HSYA与MD2的结合方式及结合位点,免疫沉淀检测HSYA对TLR4/MD2复合物生成的影响,并通过Western blotting进行作用机制探究。结果 与对照组相比,LPS能够诱导心肌细胞凋亡,促使细胞内及线粒体内活性氧(ROS)的释放,促使炎症因子白介素6(IL-6)的释放,但白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)并没有明显变化。与LPS诱导组相比,HSYA能够有效抑制LPS诱导的心肌细胞凋亡、ROS释放及炎症因子损伤;分子对接结果提示HSYA能够与MD2的疏水口袋结合,HSYA能够剂量依赖性地减少TLR4/MD2复合物的生成,提示HSYA与TLR4竞争性结合MD2蛋白。采用Westrn blotting检测TLR4、MD2、NF-κB p65磷酸化蛋白的表达,结果显示HSYA以浓度依赖的方式降低了LPS诱导的TLR4和MD2、NF-κB p65磷酸化蛋白表达。结论 HSYA能够通过靶向MD2(TLR4/MD2复合物介导),减轻LPS诱导的炎症损伤,发挥降低心肌细胞炎症损伤及凋亡的作用。

关键词

羟基红花黄色素A / 髓样分化蛋白2 / 心肌损伤