D-sn-GPHEEDA的制备及其脂质纳米粒的评价

摘要

优化以二油酰基卵磷脂为原料的1, 2-二油酰-sn-甘油-3-磷脂酰羟乙基乙二胺合成工艺，并评价脂质纳米粒的理化特性、siRNA结合力、血清稳定性和细胞毒性。通过HPLC、LC-MS、¹H-NMR、¹³C-NMR表征确证其结构，考察了酶的用量、反应时间、反应物用量、两相反应体系比对1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷脂酰羟乙基乙二胺合成的影响。结果表明，最佳反应条件为酶用量150 IU、最佳反应时间72 h、二油酰基卵磷脂与乙二胺的投料比1∶15、乙酸乙酯与乙酸钠缓冲溶液的体积比2∶1时，产率达68.72%。所得脂质纳米粒的粒径为（102.100±2.495） nm，平均多分散指数为0.183±0.023,Zeta电位为+（28.90±2.46） mV，外观呈圆形，稳定性良好；在N/P比为12∶1时可与siRNA完全结合，可显著提高siRNA的血清稳定性；MTT结果表明所合成磷脂及其LNPs对293T细胞活力无显著影响。该研究为其他磷脂酰化合物的合成及纳米递送载体的应用提供参考。

关键词

D-sn-GPHEEDA / 脂质纳米粒 / siRNA / 稳定性 / 细胞毒性