泽布替尼抑制巨噬细胞的浸润改善肾缺血-再灌注损伤后肾纤维化

摘要

目的 探讨布鲁顿酪氨酸激酶（BTK）抑制剂泽布替尼对肾缺血-再灌注损伤（RIRI）后肾纤维化的作用机制。方法 将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、造模组和造模+泽布替尼给药组（泽布替尼组），每组5只，分别进行假手术、RIRI造模、RIRI造模+泽布替尼（5 mg/kg）给药治疗，21 d后取材。观察小鼠肾脏形态学变化、组织病理学变化、肾脏M1型巨噬细胞水平变化、肾脏炎症反应变化，以及脂多糖（LPS）+干扰素（IFN）-γ体外诱导慢病毒转染巨噬细胞后相关炎症信号通路表达情况。结果 与假手术组相比，造模组小鼠的肾脏缩小、单侧肾质量与小鼠体质量比值降低、肾小管间质纤维化加重、肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白的表达均增加、肾脏F4/80和CD86的表达均增加、肾脏近曲小管管腔明显扩张、管腔内细胞碎片堆积及炎症细胞浸润、肾脏CD86、肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及IL-1β的信使RNA（mRNA）水平均升高；与造模组相比，泽布替尼组小鼠RIRI后肾脏大小恢复、单侧肾质量与小鼠体质量比值升高、肾小管间质纤维化减轻、肾脏α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的表达均减少、肾脏F4/80和CD86的表达均减少、肾脏CD45⁺淋巴细胞和CD11b⁺F4/80⁺巨噬细胞的数量均减少、CD11b⁺F4/80⁺和CD86⁺巨噬细胞在损伤组织中浸润减少、肾脏的炎症病理改变程度较轻、肾脏CD86、TNF-α、IL-6、iNOS及IL-1β的mRNA水平均降低。体外实验利用LPS+IFN-γ诱导M1型巨噬细胞发现磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、核因子（NF）-κB的磷酸化水平均升高，而敲低BTK后其磷酸化水平均降低，表明敲低BTK可能通过抑制PI3K/Akt和NF-κB相关炎症信号通路，从而减弱LPS+IFN-γ诱导的M1型巨噬细胞促炎作用。结论 泽布替尼可能通过抑制PI3K/Akt和NF-κB相关炎症信号通路，减少M1型巨噬细胞浸润和相关炎症因子表达，从而减轻RIRI后肾纤维化，为其临床应用提供了潜在依据。

关键词

泽布替尼 / 巨噬细胞 / 肾缺血-再灌注损伤 / 肾纤维化 / 布鲁顿酪氨酸激酶 / 急性肾损伤 / 脂多糖 / 成纤维细胞

基金资助

国家自然科学基金（82271805、82270783）