过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α在瑞芬太尼抗肝脏缺血-再灌注损伤中的作用研究

摘要

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)在瑞芬太尼（REM）抗肝脏缺血-再灌注损伤（HIRI）中的作用及其机制。方法 将40只SD大鼠随机分为假手术（sham）组、HIRI组、HIRI+REM组、HIRI+PGC-1α抑制剂SR-18292(HIRI+SR-18292)组和HIRI+REM+SR-18292组，每组8只。采用无创动脉夹阻断法构建HIRI大鼠模型，并于术前分别静脉注射REM或SR-18292。使用试剂盒检测大鼠血清中肝功能指标及肝组织三磷酸腺苷（ATP）水平；比色法检测大鼠肝组织中线粒体呼吸链复合物Ⅲ、Ⅳ（COX-Ⅲ、COX-Ⅳ）活性水平；苏木素-伊红染色观察大鼠肝组织病理学改变；荧光探针（DCFH-DA）法和比色法检测大鼠肝组织中活性氧簇（ROS）及氧化应激相关指标水平；实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测大鼠肝组织中线粒体DNA(mtDNA)拷贝数及PGC-1α、核呼吸因子-1(NRF-1)和线粒体转录因子A(TFAM)信使RNA(mRNA)表达水平；蛋白质印迹法检测大鼠肝组织中PGC-1α、NRF-1和TFAM蛋白表达水平。结果 与sham组比较，HIRI组大鼠肝组织病理评分及肝组织细胞坏死程度增加，血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平和肝组织中ROS、丙二醛（MDA）水平升高，肝组织中ATP含量以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、COX-Ⅲ和COX-Ⅳ活性水平降低，肝组织中mtDNA拷贝数以及PGC-1α、NRF-1、TFAM mRNA和蛋白表达水平降低（均为P<0.05）。与HIRI组比较，HIRI+REM组大鼠肝组织病理评分及肝组织细胞坏死程度下降，血清中ALT、AST水平和肝组织中ROS、MDA水平降低，肝组织中ATP含量以及SOD、GSH-Px、COX-Ⅲ和COX-Ⅳ活性水平升高，肝组织中mtDNA拷贝数以及PGC-1α、NRF-1、TFAM mRNA和蛋白表达水平升高（均为P<0.05），而HIRI+SR-18292组大鼠肝组织病理评分及肝组织细胞坏死程度增加，血清中ALT、AST水平和肝组织中ROS、MDA水平升高，肝组织中ATP含量以及SOD、GSHPx、COX-Ⅲ和COX-Ⅳ活性水平降低，肝组织中mtDNA拷贝数以及PGC-1α、NRF-1、TFAM mRNA和蛋白表达水平降低（均为P<0.05）。与HIRI+REM组比较，HIRI+REM+SR-18292组大鼠肝组织病理评分及肝组织细胞坏死程度增加，血清中ALT、AST水平和肝组织中ROS、MDA水平升高，肝组织中ATP含量以及SOD、GSHPx、COX-Ⅲ和COX-Ⅳ活性水平降低，肝组织中mtDNA拷贝数以及PGC-1α、NRF-1、TFAM mRNA和蛋白表达水平降低（均为P<0.05）。结论 PGC-1α通过促进线粒体生物合成，降低氧化应激水平，进而参与调节REM抗HIRI过程。

关键词

肝脏缺血-再灌注损伤 / 瑞芬太尼 / 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α / 线粒体呼吸链复合物 / 活性氧簇 / 线粒体DNA / 线粒体转录因子A / 核呼吸因子-1

基金资助

湖北省卫生健康委科研项目（WJ2021M084、WJ2023M176）; 湖南省人民医院医联体专项科研基金项目（2022YLT006）