MOTS-c通过调节转运体MRP2表达对甘氨鹅脱氧胆酸诱导的肝细胞损伤的影响

摘要

目的 探讨线粒体衍生肽MOTS-c对甘氨鹅脱氧胆酸（GCDCA）诱导的人肝细胞THLE-3损伤的影响及相关机制。方法 体外培养THLE-3细胞，采用不同浓度的GCDCA和MOTS-c干预THLE-3细胞，通过细胞计数试剂盒（CCK-8）法筛选出GCDCA和MOTS-c的处理浓度。再采用GCDCA(200μmol/L)、MOTS-c(15、30、60μmol/L)、多药耐药蛋白2(MRP2)抑制剂Probenecid(500μmol/L)和核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂ML385(10μmol/L)对THLE-3细胞进行处理或预处理，采用CCK-8法检测各组细胞增殖率；生化法检测各组细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）水平；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测细胞中MRP2信使RNA(mRNA)水平；蛋白质印迹法检测细胞中MRP2和Nrf2蛋白表达水平。结果 随着GCDCA处理浓度的升高，THLE-3细胞增殖活性逐渐降低，细胞培养液中LDH活性及细胞凋亡水平逐渐升高，细胞中MRP2表达水平均逐渐降低（均为P<0.05）。30、60μmol/L MOTS-c干预均可提高GCDCA暴露下THLE-3细胞增殖活性，上调细胞中MRP2和Nrf2表达水平，而降低细胞培养液中LDH活性及细胞凋亡水平（均为P<0.05）。联合Probenecid干预可部分逆转MOTS-c对GCDCA诱导的THLE-3细胞损伤的改善作用，联合ML385干预则又可部分抑制MOTS-c干预对GCDCA暴露下THLE-3细胞中MRP2表达的诱导作用。结论 MOTS-c可减轻GCDCA诱导的人肝细胞THLE-3损伤，其作用机制可能与促进Nrf2介导的MRP2表达上调有关。

关键词

胆汁淤积 / 缺血-再灌注损伤 / 肝移植 / 肝损伤 / 甘氨鹅脱氧胆酸 / MOTS-c / 核因子E2相关因子2 / 多药耐药蛋白2