miR-155-5p通过调控心肌细胞焦亡对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响及机制研究

摘要

目的 探讨微小RNA(miR)-155-5p对心肌缺血-再灌注损伤（IRI）大鼠心肌细胞焦亡的影响及机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术（sham）组、IRI组、agomir-NC组、miR-155-5p agomir组、antagomirNC组和miR-155-5p antagomir组，每组10只。采用超声心动图仪测定大鼠左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率（LVFS）。酶联免疫吸附试验检测大鼠血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）和心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平，心肌组织白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-18和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平；苏木素-伊红染色观察大鼠心肌组织病理学变化；实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠心肌组织miR-155-5p和沉默信息调节因子1(SIRT1)信使RNA(mRNA)表达水平；双荧光素酶报告基因实验验证miR-155-5p与SIRT1的靶向关系；蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织SIRT1、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Cleaved Caspase-1)和GSDMD蛋白表达水平。结果 与sham组比较，IRI组大鼠LVEDD和LVESD升高，LVEF和LVFS降低，血清CK-MB、LDH和c TnT水平升高，心肌组织IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平升高，心肌组织结构破坏严重，心肌纤维排列紊乱，NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量升高，SIRT1蛋白相对表达量降低（均为P<0.05/5）。与IRI组比较，miR-155-5p agomir组大鼠LVEDD和LVESD升高，LVEF和LVFS降低，血清CK-MB、LDH和c TnT水平升高，心肌组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平升高，心肌组织病变程度加重，NLRP3、 CleavedCaspase-1和GSDMD蛋白相对表达量升高，SIRT1蛋白相对表达量降低；miR-155-5p antagomir组大鼠LVEDD和LVESD降低，LVEF和LVFS升高，血清CK-MB、LDH和cTnT水平降低，心肌组织中IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平降低，心肌组织病变程度减轻，NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD蛋白相对表达量下降，SIRT1蛋白相对表达量升高（均为P<0.05/5）。miR-155-5p与SIRT1在大鼠心肌组织中的表达水平呈负相关，且SIRT1是miR-155-5p的靶基因。结论 miR-155-5p可能通过靶向下调SIRT1促进NLRP3介导的心肌细胞焦亡参与调节大鼠心肌IRI。

关键词

心肌 / 缺血-再灌注损伤 / 微小RNA / 沉默信息调节因子1 / NOD样受体蛋白3 / 细胞焦亡 / 炎症因子 / 炎症小体