基于铁死亡探讨乌司他丁对肝缺血-再灌注损伤的保护作用

摘要

目的 探讨乌司他丁对肝缺血-再灌注损伤的保护作用及机制。方法 24只雄性SD大鼠分成3组，分别为假手术组（Sham组）、肝缺血-再灌注损伤组（HIRI组）、肝缺血-再灌注损伤+乌司他丁预处理组（HIRI+UTI组），每组8只。采用阻断肝门静脉和肝动脉1 h的方法建立大鼠HIRI模型，HIRI+UTI组于造模前30 min腹腔注射乌司他丁，Sham组和HIRI组腹腔注射等量的生理盐水。造模6 h后处死大鼠，收集大鼠血清检测丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平；采用苏木素-伊红（HE）染色法检测肝组织病理学改变；透射电镜观察肝组织线粒体超微结构改变；免疫荧光检测谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)表达；检测肝组织丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、铁、活性氧簇（ROS）及GPX4含量；检测肝组织GPX4、酰基辅酶A合成酶长链家族4(ACSL4)信使RNA(mRNA)和蛋白表达水平。结果 与Sham组相比，HIRI组血清ALT、AST水平升高，肝脏出现淤血、肝细胞坏死和肝小叶结构异常等病理改变，病理学评分升高，线粒体缩小，膜密度增加，线粒体嵴断裂甚至消失，ROS、MDA、铁含量升高，GSH含量下降，GPX4荧光强度减弱，ACSL4mRNA及蛋白相对表达量升高，GPX4 mRNA和蛋白相对表达量降低（均为P<0.05）。与HIRI组比较，HIRI+UTI组血清ALT、AST水平降低，肝组织损伤减轻，病理学评分降低，线粒体缩小、嵴断裂情况改善，ROS、MDA、铁含量降低，GSH含量升高，GPX4荧光强度增强，ACSL4 mRNA和蛋白相对表达量降低，GPX4mRNA和蛋白相对表达量升高（均为P<0.05）。结论 乌司他丁可减轻大鼠肝缺血-再灌注损伤，其机制可能是通过抑制铁死亡。

关键词

缺血-再灌注损伤 / 肝移植 / 乌司他丁 / 铁死亡 / 谷胱甘肽过氧化酶4 / 酰基辅酶A合成酶长链家族4 / 活性氧簇 / 丙二醛