微型灌注仪保存猪离断肢体安全性有效性研究

摘要

目的 评估自主研发的微型常温机械灌注（NMP）系统（微型灌注仪）保存猪离断肢体的安全性与有效性。方法 选取5头健康长白猪，左右前肢随机分为NMP组与静态冷保存（SCS）组。NMP组采用自主研发的微型灌注仪和聚合血红蛋白灌注液进行32 h常温灌注，SCS组于4℃保存。监测灌注压、流量等血流动力学参数，检测灌注液pH值、氧分压（PO₂）、乳酸（Lac）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）等，苏木素-伊红染色评估肌肉组织结构，脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法评估肌肉细胞凋亡情况，免疫组织化学检测肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-6表达。混合效应模型分析时间和处理方式对组织结构、细胞凋亡与炎症因子的影响。结果 设备可稳定维持灌注压（69±15）mmHg、流量（117±42）mL/min，灌注液pH值和电解质总体稳定，PO₂维持在高水平。Lac维持在5.38（3.81,6.45）mmoI/L,CK、LDH随时间延长上升。NMP组32 h灌注后，肌细胞间距、细胞凋亡率均优于SCS组，混合效应模型分析显示单位时间下NMP处理与SCS处理对肌细胞间距和细胞凋亡率作用差异有统计学意义（均为P<0.05）。两组TNF-α和IL-6差异无统计学意义，混合效应模型分析显示单位时间下NMP处理与SCS处理对TNF-α和IL-6作用差异无统计学意义（均为P>0.05）。结论 本研究所用的微型灌注仪能够在猪断肢模型实现32 h常温保存，维持基本代谢与离子稳态，减轻肌肉结构损伤和细胞凋亡，且未诱导额外炎症反应。该技术有望在灾害救援、长途转运中显著延长断肢可再植时间窗，为临床转化与后续再植研究提供重要技术基础。

关键词

灌注仪 / 微型 / 常温机械灌注 / 静态冷保存 / 断肢保存 / 肢体再植 / 缺血-再灌注损伤 / 炎症反应