YTHDF1对缺氧复氧损伤后H9c2心肌细胞凋亡及氧化应激的影响

摘要

目的 探讨含YTH域家族蛋白1(YTHDF1)对缺氧复氧(H/R)条件下H9c2细胞凋亡和氧化应激的影响。方法 用H9c2细胞构建H/R模型，并用YTHDF1小干扰RNA(siRNA)和过表达质粒转染细胞，采用MTT比色法测定细胞活力，并用赫斯特染色及流式细胞术测定细胞凋亡及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和细胞培养基上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性，Western blot法测定细胞中YTHDF1、cleaved caspase-3、Bax和FasL的蛋白水平，比较对照组(control组)、H/R组、YTHDF1基因干扰和过表达组H9c2细胞凋亡和氧化损伤情况。结果 H/R损伤后LDH活性和MDA含量明显升高(P<0.05),SOD活性和细胞活力显著降低(P<0.05),H/R处理后H9c2细胞中YTHDF1的蛋白水平均显著升高(P<0.05);YTHDF1干扰减轻了H/R损伤引起的形态学变化，YTHDF1过表达增加了H/R损伤引起的细胞形态变化；H/R损伤处理后cleaved caspase-3、Bax和FasL蛋白表达显著高于control组(P<0.05);H/R+YTHDF1-siRNA组cleaved caspase-3、Bax和FasL的蛋白水平显著低于H/R组(P<0.05),H/R+pcDNA3.1-YTHDF1组cleaved caspase-3、Bax和FasL蛋白水平显著高于H/R组(P<0.05)。结论 下调YTHDF1可以抑制H/R处理的H9c2细胞cleaved caspase-3、Bax和FasL蛋白水平的上调并降低H/R处理的心肌细胞氧化损伤。

关键词

YTH域家族蛋白1 / 缺氧复氧 / H9c2细胞 / 凋亡 / 氧化应激