交泰丸含药血清通过激活SIRT1抑制内质网应激改善高糖高脂对SH-SY5Y细胞的损伤

摘要

目的：探讨交泰丸改善高糖高脂对SH-SY5Y细胞损伤的可能作用机制。方法：将20只SD大鼠随机分为交泰丸组和空白组，每组10只。交泰丸组予交泰丸药液8.4 g·kg^-1灌胃，空白组予生理盐水灌胃，连续灌胃7 d，制备交泰丸血清和空白血清。体外培养SH-SY5Y细胞，用不同比例血清给药处理24 h后，采用CCK-8法检测交泰丸含药血清对SH-SY5Y细胞增殖活力影响；用25 mmol·L^-1高糖和200μmol·L^-1棕榈酸造模，按含药血清比例分为对照组和交泰丸含药血清低、高剂量组，SIRT1抑制剂EX527组。采用Western blot法检测各组细胞中内质网相关蛋白，肌醇需酶1α（inositol-requiring enzyme 1α, IRE1α）、磷酸化-肌醇需酶1α（phospho-inositolrequiring enzyme 1α, p-IRE1α）、蛋白激酶R样内质网激酶（protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK）、磷酸化-蛋白激酶R样内质网激酶（phospho-protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase, p-PERK）、激活性转录因子6（activating transcription factor 6, ATF6）、葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78,GRP78）、蛋白二硫键异构酶（protein disulfide isomerase, PDI）及沉默信息调节因子1（silent information regulator1,SIRT1）蛋白表达水平，免疫荧光检测各组细胞中关键蛋白（SIRT1、p-IRE1α、p-PERK）的表达情况。结果：与对照组相比，模型组GRP78、p-PERK与PERK比值、p-IRE1α与IRE1α比值显著升高（P<0.05）,SIRT1、PDI显著降低（P<0.05）；与模型组相比，交泰丸低、高浓度组SIRT1、PDI表达上调、GRP78、p-PERK与PERK比值、p-IRE1α与IRE1α比值表达下调，且呈浓度依赖性（P<0.05）,EX527组显著逆转交泰丸含药血清作用。结论：交泰丸含药血清可改善高糖高脂对SH-SY5Y细胞的损伤，其作用机制可能与提高SIRT1表达，抑制内质网应激有关。

关键词

交泰丸 / 高糖高脂 / SIRT1 / 内质网应激 / 未折叠蛋白反应