Cyclin D1在黄芪甲苷诱导BMSCs向神经元样细胞分化中的表达

摘要

目的：研究黄芪甲苷诱导骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）分化的特点和诱导过程中Cyclin D1的表达特点。方法：采用100 mg·L^-1黄芪甲苷诱导BMSCs分化，在1、12、24 h倒置显微镜观察细胞形态变化，免疫细胞化学方法观察巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase,NSE）、Cyclin D1的表达,RT-PCR检测Cyclin D1 mRNA的表达。结果：收集获得的骨髓细胞采用原代和传代培养，至第3代BMSCs细胞基本纯化。经100 mg·L^-1黄芪甲苷作用后，部分细胞自胞体长出突起，形态似神经元样细胞且表达Nestin和NSE抗体，Nestin的表达时相早于NSE且表达强度高于NSE（P<0.05）。在药物作用1 h后，BMSCs细胞Cyclin D1不论在基因转录水平还是在蛋白表达水平均出现大幅度下调，此时BMSCs开始有Nestin的表达；药物作用12、24 h,BMSCs细胞Cyclin D1表达与药物作用前表达水平无显著性差异（P>0.05）。结论：黄芪甲苷可能首先通过调整细胞周期，延长了G1期向S期转变的时间，从而启动了BMSCs的分化程序，诱导BMSCs向神经干细胞分化。在黄芪甲苷的营养作用下，细胞的突起进一步生长并向神经元分化。

关键词

黄芪甲苷 / BMSCs / 分化 / 神经元样细胞 / Cyclin D1