基于网络药理学和分子对接探讨牛磺酸治疗年龄相关性黄斑病变的机制

摘要

目的：利用网络药理学及分子对接技术并通过体外实验探究牛磺酸（Taurine）对治疗年龄相关性黄斑病变（age-related macular degeneration,AMD）的作用及机制。方法：利用不同数据库获取并筛出Taurine和AMD的交集靶点。通过蛋白互作用网络（protein-protein interaction networks,PPI）等探究Taurine对AMD作用机制，并由分子对接技术初步验证。体外实验采用增殖检测试剂盒（CCK-8）、β半乳糖苷酶试剂盒、蛋白质免疫印记、ELISA试剂盒、RT-qPCR法验证Taurine通过SRC-P53-MPO轴抑制炎症对ARPE-19细胞有抗衰老作用。结果：通过网络药理学分析，Taurine和AMD的靶点交集过后包括了类固醇受体辅助活化因子（steroid receptor coactivating protein,SRC）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）等炎症相关因子以及肿瘤蛋白53（tumor protein 53,P53）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）等细胞衰老的相关靶点；基因本体（gene ontology,GO）生物功能以及京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of GenesandGenomes,KEGG）通路富集分析的结果显示其包含了衰老炎症相关的信号通路。β-半乳糖苷酶染色结果与CCK-8实验结果表明H2O2(100μmol·L^-1)作用于APRE-19细胞培养24 h较为合适，Taurine 10、20、40mmol·L^-1为适合浓度。WB结果显示，与模型组相比，Taurine组SRC明显上升，P53、MPO明显下降。PCR结果显示，与模型组比较，Taurine组SRC mRNA水平明显上升，P53、MPO mRNA水平明显下降。ELISA结果显示，与模型组相比，Taurine组IL-6、TNF-α明显下降。结论：通过网络药理学、分子对接及体外细胞实验证实了Taurine通过SRC-P53-MPO轴抑制炎症对ARPE-19细胞有抗衰老作用，为进一步阐释Taurine治疗AMD的作用机制提供了科学依据。

关键词

牛磺酸 / 年龄相关性黄斑病变 / 分子对接 / 网络药理学 / P53靶点