四氢孕酮抗焦虑状态行为学活性评价及其作用机制探究

摘要

四氢孕酮（Allo）在焦虑症的治疗方面展现出了巨大的潜力，但Allo的抗焦虑状态行为学活性的作用机制尚未系统报道，因此围绕四氢孕酮在抗焦虑状态行为学活性评价是研究者们需要重点关注的方向。本研究拟采用小鼠急性束缚应激（ARS）模型评价Allo对焦虑状态行为的影响，通过行为学实验评价Allo的抗焦虑状态效应，进而观察Allo对神经可塑性的调节，为阐明Allo快速抗焦虑状态的神经生物学机制提供依据。目的：用小鼠急性束缚应激（acute restraint stress,ARS）模型评价四氢孕酮（Allo）对焦虑状态行为的影响。方法：建立小鼠2 d,每次3 h的ARS模型，实验分组均为正常对照组、模型组、模型+Allo组。在小鼠ARS模型中，造模后立即进行单次ip给予Allo 10 mg·kg^-1。1 h后进行行为学，以开场实验（OFT）和高架十字迷宫实验（EPMT）评价焦虑状态行为。随后取脑组织，通过高尔基染色法探究Allo对小鼠内侧前额叶皮层（medial prefrontal cortex,mPFC）和海马（Hippo）神经元树突棘交点总数和树突棘密度变化的影响；通过ELISA实验检测皮层和海马突触相关因子（Allo、BDNF、GluA1、SYN1、GABA）的表达；通过免疫荧光法（immunofluorescence,IF）标记小鼠mPFC和Hippo齿状回c-fos,探究Allo对c-fos的影响。结果：（1）在小鼠ARS模型上，与正常对照组相比，模型组小鼠在OFT中进入中央区的潜伏期显著延长（P<0.05）、累计次数显著减少（P<0.01），在EPMT中开臂区停留时间百分比和进入次数百分比显著降低（P<0.05）；与模型组相比，模型+Allo组10 mg·kg^-1上述变化均可显著逆转（P<0.05）。（2）与行为学结果一致，Allo能够逆转ARS模型小鼠中mPFC和海马树突棘交点总数减少和树突棘密度下降。（3） ELISA实验结果显示，ARS可导致皮层和海马突触相关因子Allo、BDNF、GluA1、SYN1的表达降低，该效应可以被Allo逆转，提示Allo抗焦虑状态行为学活性可能与皮层和海马突触可塑性相关。（4）免疫荧光结果显示急性焦虑束缚可导致mPFC和海马的c-fos表达显著下降，干预Allo后可恢复其表达，提示皮层和海马是四氢孕酮调节急性焦虑状态的重要脑区。结论：Allo单次10 mg·kg^-1 ip给药可显著降低ARS模型小鼠焦虑情绪的表达，缓解焦虑状态行为。

关键词

焦虑状态 / 四氢孕酮 / 急性束缚应激

基金资助

科技创新2030(No.2021ZD0202000、No.2021ZD0200900)