PI4K2a增强M通道开放剂治疗持续性癫痫活性机制研究

摘要

目的：M通道开放剂（如瑞替加滨）在多种体内癫痫及惊厥模型中表现出广谱抗癫痫活性。然而，M₁R毒蕈碱受体介导的膜磷脂PI（4,5）P₂水解会破坏瑞替加滨激活KCNQ电流的能力。有研究报道，在红藻氨酸诱导的惊厥模型中，由于神经元M电流受抑制，瑞替加滨治疗持续性癫痫的活性完全消失。本研究旨在探讨PI（4,5）P2合成关键激酶PI4K2a能否在PI（4,5）P₂耗竭时恢复M通道开放剂对KCNQ2通道的调控作用，及其增强体内治疗持续性癫痫的能力。方法：在KCNQ2和M1R毒蕈碱受体共表达CHO细胞中，采用全细胞膜片钳技术测定两种作用位点不同的M通道开放剂：瑞替加滨和ICA069673，在共给蕈碱受体激动剂oxotremorine-M（oxo-M）后对通道的激动活性，以及给予PI4K2a激动剂（20S）-人参皂苷Rg3后M通道开放剂活性的改变；在原代海马神经元中，采用全细胞膜片钳技术测定瑞替加滨在oxo-M诱导PI（4,5）P2水解时神经元M电流及动作电位，以及激动PI4K2a后活性的改变；应用硬膜外脑电（EEG）记录测定在海马过表达PI4K2a后，瑞替加滨对毛果芸香碱诱导的持续性癫痫模型中的治疗作用。结果：电生理记录显示，在KCNQ2-M₁R CHO细胞中，通过药理学激活PI4K2a可增加M通道开放剂对KCNQ2电流的增强作用：瑞替加滨诱导的电流增幅达～262%,ICA069673诱导的电流增幅达～204%。在原代海马神经元中，激活PI4K2a能促进瑞替加滨对M电流的激动作用，并显著抑制oxo-M诱导的神经元过度兴奋。硬膜外脑电图（EEG）记录毛果芸香碱诱导的癫痫持续状态模型中，过表达PI4K2a可增强瑞替加滨治疗持续性癫痫的活性，显著降低脑电功率。结论：本研究证实PI4K2a是调控M通道开放剂疗效的关键分子，其药理学激活可作为克服癫痫治疗中PI（4,5）P₂耗竭所致耐药性的潜在策略。

关键词

M通道开放剂 / KCNQ / 持续性癫痫 / PI(4,5)P2