基于SPR-MS联合法鉴定Mas的互作蛋白

摘要

目的 基于表面等离子共振（SPR）和质谱（MS）的联用技术从细胞裂解液中鉴定Mas互作蛋白。方法 将重组蛋白GST-Mas-CT和GST分别高水平固定在2张CM5芯片的4个通道上，将细胞裂解液(总蛋白质量浓度0.5 mg·mL^-1)注入芯片表面，回收蛋白经超滤辅助样品制备（FASP）后，进行MS鉴定。使用韦恩图分析Mas-CT和GST的差异互作蛋白，利用DAVID数据库对Mas-CT的差异互作蛋白进行GO和KEGG分析。结果 回收蛋白中共有785个Mas-CT的差异互作蛋白；生物信息学分析显示Mas互作蛋白主要富集在免疫反应、钙离子应答、感染、血小板激活等生物学过程或通路。结论 SPR-MS联合法适用于从细胞裂解液等复杂体系中捕获和鉴定靶蛋白的互作蛋白。

关键词

表面等离子共振技术 / 质谱技术 / Mas受体 / 生物信息学分析 / 蛋白质相互作用