敲除CISH敲入并IL-15显著增强NK细胞抗肿瘤活性的研究

摘要

背景 白细胞介素(interleukin,IL)-15是调节自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)功能的关键细胞因子，而CISH可负向调控IL-15信号通路，从而影响NK细胞功能。靶向CISH基因和IL-15基因对NK细胞进行基因编辑，可增强NK细胞抗肿瘤活性。目的 探讨CISH基因、IL-15基因对NK细胞的细胞毒性的影响。方法 采用AsCas12a Ultra基因编辑工具敲除CISH基因，并敲入IL-15基因，对NK细胞进行基因编辑，并通过基因测序检测CISH基因敲除效率，采用ELISA检测IL-15的表达，用LDH检测基因编辑后的NK细胞对H358细胞系的杀伤活性，评估CISH基因敲除、IL-15基因敲入对NK细胞抗肿瘤功能的影响。结果 与对照组相比，CISH基因敲除组和CISH基因敲除+IL-15基因敲入组杀伤效率显著增强[E∶T=2∶1组，34.57%±6.32%vs 71.40%±5.81%和69.23%±4.28%,P<0.001]。结论 敲除CISH基因可上调IL-15信号通路，增强NK细胞抗肿瘤活性。

关键词

自然杀伤细胞 / CISH / 白细胞介素-15 / AsCas12a Ultra