长链非编码RNA POT1-AS1在宫颈癌顺铂耐药中的作用研究

摘要

背景 同步放化疗是晚期宫颈癌(cervical cancer,CC)的治疗方法，顺铂(cisplatin,CDDP)是目前临床化疗使用的主要药物之一，CDDP耐药的发生严重制约了其临床应用，因此针对CDDP耐药发生机制的研究对CC的治疗至关重要。目的 探索长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) POT1-AS1在宫颈癌CDDP耐药中的作用。方法 基于TCGA数据库，分析POT1-AS1在CC组织及正常组织中的表达情况，并分析POT1-AS1的表达量与预后的关系。采用CCK-8实验评估CDDP处理后的耐药细胞系和亲本细胞系、siPOT1-AS1组和siNC组的活力并测定相应的半抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC50)。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测POT1-AS1在耐药细胞系及相应亲本细胞系中的表达以及POT1-AS1表达与CDDP作用时间的相关性。克隆形成实验检测POT1-AS1对CDDP耐药细胞增殖情况的影响。PI/DAPI双染荧光用于评估POT1-AS1与CDDP诱导的细胞死亡的相关性。结果 POT1-AS1在CC肿瘤组织中高表达，并与不良预后相关。耐药细胞系的细胞活力及IC50值显著高于亲本细胞系(P<0.001),POT1-AS1沉默组的细胞活力及IC50值显著低于阴性对照(negative control,NC)组(P<0.001)，差异均有统计学意义。POT1-AS1在耐药细胞系中的表达显著高于亲本细胞系(P<0.001)，且随着CDDP给药时间的延长而增加。沉默POT1-AS1后可显著抑制耐药细胞的增殖能力(P<0.01)。与NC组相比，POT1-AS1沉默组的CC耐药细胞死亡率显著增加(P<0.01)，尤其是在加入CDDP作用后(P<0.01)。结论 POT1-AS1与宫颈癌CDDP耐药密切相关，并通过抑制CDDP诱导的细胞死亡发挥促癌作用。

关键词

宫颈癌 / 长链非编码RNA / POT1-AS1 / 顺铂 / 耐药