基于共聚焦激光显微内镜的海水淹溺肺损伤大鼠肺通透性的实时活体评价

摘要

背景 急性肺损伤是临床常见急危重症，其核心病理特征是气血屏障的破坏，目前对肺损伤中气血屏障结构及功能改变进行活体评估的研究甚少。目的 使用共聚焦激光显微内镜实现大鼠肺的在体可视化成像和海水淹溺肺损伤大鼠肺通透性的实时动态活体评估。方法 10只SD大鼠随机分为对照组和海水淹溺(seawater drowning,SW)组，每组5只；SW组通过气管滴注人工海水建立海水淹溺肺损伤模型，造模后3 h进行肺活体观察窗开窗手术，4 h时经股静脉推注0.2 mL异硫氰酸荧光素-葡聚糖(10 mg/mL)；对照组不进行海水滴注，其余操作同SW组。使用共聚焦激光显微内镜对右肺下叶进行30 min活体观察，对成像0 min、10 min、20 min、30 min时的共聚焦图像进行染料渗漏指数及荧光分布均匀程度的分析；成像结束后处死大鼠，取肺组织、外周血及肺泡灌洗液，进行组织病理学检查、FITC-Dextran渗漏量检测、肺泡灌洗液蛋白含量检测及肺组织湿/干比测定。结果 经静脉给予FITC-Dextran后，共聚焦激光显微内镜下可观察到肺微循环和肺泡结构的实时图像；对照组血管及肺泡结构较清晰，未出现血管外空间荧光强度的明显增加，而SW组血管结构随时间推移逐渐模糊，各时间点SW组的渗漏指数均高于对照组(P<0.05),10 min、20 min、30 min时荧光分布的变异系数均低于对照组(P<0.05);SW组的染料渗漏量、肺泡灌洗液蛋白含量及肺组织湿/干比均高于对照组(P<0.05)。结论 海水淹溺造成大鼠肺组织结构破坏，肺通透性增加；利用共聚焦激光显微内镜可实现大鼠肺组织结构的在体可视化成像，通过对共聚焦图像的定量分析，还可实现大鼠气血屏障通透性的实时活体评估。

关键词

急性肺损伤 / 活体成像 / 共聚焦激光显微内镜 / 气血屏障 / 肺通透性