人源化六基因编辑猪红细胞治疗恒河猴急性失血性休克的疗效观察

摘要

背景 临床上血液制品短缺是一项世界难题，猪红细胞与人类红细胞有诸多相似之处，有望解决这一难题。目的 将人源化基因编辑猪(GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM)的红细胞输注至非人灵长类动物恒河猴体内，探讨异种输血的可能性。方法 采用盐水介质交叉配血法，检测六基因编辑猪红细胞(6GE-pRBC)与恒河猴的血液凝集情况。通过IgG、IgM结合实验和补体介导的细胞毒性实验验证异种输血安全性，从恒河猴体内抽取25%血容量血液后输注等量的异硫氰酸荧光素标记6GE-pRBC，通过流式细胞分析术监测在其体内的存活状态，并定期采集受体血液样本验证异种输血的有效性，观察6GE-pRBC输注治疗失血性休克恒河猴的可能性。结果 6GE-pRBC与恒河猴主次侧交叉配血试验均为阴性；其基因表型鉴定符合预期结果；恒河猴血清与6GE-pRBC的IgG、IgM结合实验结果显示IgG(3.35%)、IgM(4.13%)表达量较低；6GE-pRBC的补体介导细胞毒作用(CDC)显著低于野生猪红细胞(P<0.000 1)。输血后60 h 6GEpRBC在恒河猴体内仍存活；血细胞比容失血后为28.6%,60 h升高至35%；血红蛋白含量失血后为92 g/L,60 h升高至116 g/L并维持于失血前正常水平。结论 6-GE-pRBC输注给恒河猴在一定时间内能有效地纠正恒河猴休克症状，且未发现免疫排斥反应。随着基因编辑技术不断创新，基因编辑猪红细胞有望替代人红细胞治疗人类急性失血性休克。

关键词

异种输血 / 人源化编辑猪 / 猪红细胞 / 恒河猴 / 免疫排斥反应