颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化过程中线粒体功能变化的研究

摘要

背景 线粒体对成骨分化起着关键调控作用，但颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow mesenchymal stem cells,JBMMSCs)成骨分化过程中线粒体功能的变化尚不明确。目的 探究JBMMSCs成骨分化过程中线粒体功能的变化。方法 提取小鼠JBMMSCs进行培养并进行鉴定。采用第3代JBMMSCs接种于孔板内，设置为对照组、成骨诱导3 d组、成骨诱导7 d组；检测ATP含量和柠檬酸合酶活性；RT-qPCR检测线粒体功能相关标志物MFN1、MFN2、NRF1、PGC-1α的m RNA表达；Western blot分析线粒体功能相关标志物MFN1、MFN2、FIS1、COXⅣ的蛋白表达；JC-1染色评估线粒体膜电位。结果 提取的JBMMSCs形态呈长梭形，具有三向分化潜能。与对照组相比，成骨诱导7 d时，ATP含量和柠檬酸合酶活性增加(P均<0.05);RT-qPCR结果 表明，线粒体功能相关标志物MFN1、MFN2、NRF1、PGC-1α的m RNA表达上调(P <0.05);Western blot结果 显示，MFN1、MFN2、FIS1、COXⅣ的蛋白表达上调(P均<0.05);JC-1染色结果 证实，线粒体膜电位升高(P<0.05)。结论 JBMMSCs成骨分化过程中线粒体功能相关标志物均表达上调，提示线粒体功能增强。

关键词

颌骨骨髓间充质干细胞 / 成骨分化 / ATP / 线粒体动力学 / 线粒体生物发生