低温等离子体对大鼠口腔颌面部伤口愈合的作用研究

摘要

背景 低温等离子体(cold atmospheric plasma,CAP)因具有灭菌以及促进细胞增殖、血管新生和胶原合成等作用，在医学领域逐渐受到关注，有广泛的应用前景，但其在口腔颌面部伤口治疗中的应用仍有待探索。目的 探讨CAP对大鼠口腔颌面部伤口愈合的作用，为CAP应用于口腔颌面部伤口的治疗提供依据。方法 采用CCK-8实验和细胞迁移实验评估不同参数下CAP对大鼠口腔黏膜成纤维细胞增殖和迁移能力的影响，以确定最佳实验参数。在炎症诱导条件下，利用实时定量PCR和Western blot检测经CAP处理后的大鼠口腔黏膜成纤维细胞炎症相关指标[肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6]和修复相关指标[转化生长因子β (transforming growth factor-β,TGF-β)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠalphaⅠchain,COL1A1)]的水平变化。选取36只SPF级雄性SD大鼠建立颊部贯通伤模型。实验动物随机分为对照组(n=18)和CAP组(n=18)。对照组伤口自然愈合，CAP组大鼠伤口每日使用CAP进行治疗。通过HE、Masson染色及免疫组织化学染色观察大鼠口腔颌面部伤口组织变化；通过Western blot比较两组伤口组织炎症相关指标(TNF-α、IL-1β、IL-6)和修复相关指标(TGF-β、VEGF、COL1A1)的蛋白表达情况。结果 CAP可提高大鼠口腔黏膜成纤维细胞的增殖和迁移能力(P<0.05)。40%-30 s为最佳实验设备参数，该参数下CAP可使炎症微环境下大鼠口腔黏膜成纤维细胞炎症相关指标(TNF-α、IL-1β、IL-6)表达下降(P<0.05)，修复相关指标(TGF-β、VEGF、COL1A1)表达升高(P<0.05)。动物实验进一步验证，CAP组伤口愈合程度优于对照组，HE及Masson染色结果 表明CAP组伤口边缘的皮肤和口腔黏膜生长更连贯，胶原纤维增生更明显。免疫组织化学染色观察到修复相关指标COL1A1和VEGF在CAP组伤口的皮肤和口腔黏膜组织中表达更高。Western blot结果 显示，与对照组相比，CAP组动物伤口组织炎症指标(TNF-α、IL-1β、IL-6)表达相对较低(P<0.05)；修复相关指标VEGF和COL1A1表达水平均较高(P<0.05)，与动物实验病理切片观察结果 一致。结论 CAP治疗可以通过促进细胞增殖与迁移、减轻炎症反应、增强修复相关因子表达等方面相互协作共同促进口腔颌面部伤口的愈合，降低了伤口迁延不愈的风险。

关键词

低温等离子体 / 口腔颌面部 / 伤口 / 炎症 / 愈合