人羊膜间充质干细胞对松木屑烟雾溶液染毒大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖、凋亡及炎症因子影响的研究

摘要

背景 烟雾吸入性肺损伤在烧伤患者中较为常见，吸入的有毒气体、颗粒等易引起急性肺损伤(acute lung injury,ALI)，目前无特异性治疗方法。目的 研究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)对松木屑烟雾溶液染毒大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cells,AT-Ⅱ)增殖、凋亡及炎症因子的影响。方法 采用酶消化法分离培养hAMSCs和AT-Ⅱ，采用流式细胞术和免疫荧光分别鉴定hAMSCs和AT-Ⅱ；松木屑烟雾溶液染毒AT-Ⅱ复制烟雾诱导的细胞损伤。实验细胞分为对照组(无血清DMEM/F12)、致伤组(0.75‰松木屑烟雾溶液染毒)和治疗组(0.75‰松木屑烟雾溶液染毒，hAMSCs与AT-Ⅱ共培养)。采用CCK-8检测细胞的增殖活性；Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡；Elisa检测炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6和IL-10的表达。结果 与对照组比较，致伤组AT-Ⅱ的活性降低(P<0.01)，经hAMSCs治疗后，与致伤组比较，AT-Ⅱ细胞活性增加(P<0.01)；致伤组细胞的凋亡率在12 h和24 h均增加(P<0.01),hAMSCs治疗后细胞凋亡率降低(P<0.01)；细胞致伤后炎症因子TNF-α、IL-6和IL-10的含量增加(P<0.05)，经hAMSCs共培养12 h和24 h后，促炎因子TNF-α和IL-6的表达均下调(P<0.05),IL-10含量增加(P<0.05)。结论 hAMSCs可以促进松木屑烟雾溶液诱导的AT-Ⅱ增殖和抑制细胞凋亡，可能与调节炎症因子的表达有关，为探究hAMSCs治疗烟雾引起的急性肺损伤提供理论依据。

关键词

人羊膜间充质干细胞 / 肺泡Ⅱ型上皮细胞 / 增殖 / 凋亡 / 炎症因子