间歇性肾门阻断减轻糖尿病小鼠肾缺血再灌注损伤的作用研究

摘要

背景 合并糖尿病的肾肿瘤患者在保留肾单位手术(nephron sparing surgery,NSS)后慢性肾病发病率高，临床缺乏有效预防及干预手段。目的 探讨不同热缺血时间梯度下合并糖尿病对小鼠肾缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤的影响，并分析间歇性肾门阻断减轻糖尿病小鼠肾缺血再灌注损伤的作用。方法 (1)雄性C57BL/6J糖尿病小鼠和普通小鼠各36只，分别随机分为假手术组和5个单侧肾IR损伤组(IR-15 min组、IR-20 min组、IR-25 min组、IR-30 min组、IR-35 min组)，每组小鼠6只，再灌注24 h后通过功能学、组织学、免疫学等方法评估急性肾损伤、细胞凋亡及氧化应激损伤水平，分析不同缺血时间下糖尿病对小鼠肾IR损伤的影响。(2)雄性C57BL/6J糖尿病小鼠18只，随机分为持续肾门阻断组(30 min)、间歇性肾门阻断组(在30 min缺血过程中给予5 min开放血流，周期为15 min-5 min-15 min)和假手术组，每组小鼠6只，再灌注24 h后评估急性肾损伤、细胞凋亡及氧化应激损伤水平。结果 (1)缺血时间为15 min时，糖尿病小鼠与普通小鼠术后均未观察到明显的肾功能损伤、病理损伤和氧化应激损伤；缺血时间为20 min和25 min时，糖尿病小鼠的各项肾功能损伤、病理损伤和氧化应激损伤指标均高于普通小鼠；缺血时间为30 min和35 min时，糖尿病小鼠与普通小鼠术后肾功能损伤和病理损伤均为重度，两组差异无统计学意义(P>0.05)。(2)相比持续性肾门阻断组，间歇性肾门阻断组术后24 h血肌酐水平(P<0.001)、急性肾小管坏死评分(P<0.001)、免疫组化NGAL半定量评分(P<0.001)、TUNEL凋亡评分(P<0.001)、丙二醛水平(P<0.01)和恢复过氧化氢酶活力(P<0.001)降低。结论 缺血时间较短时，合并糖尿病不加重小鼠肾IR后急性肾损伤；缺血时间超过20 min后，合并糖尿病加重了小鼠肾IR后急性损伤。间歇性肾门阻断可大幅减轻糖尿病小鼠IR后急性肾损伤，抑制氧化应激损伤发生，提示间歇性肾门阻断可能是肾肿瘤合并糖尿病患者在NSS中减轻外科缺血性肾损伤的有效手段。

关键词

肾损伤 / 糖尿病 / 缺血再灌注 / 间歇性肾门阻断 / 氧化应激