甲型H1N1流感病毒感染小鼠肺共信号分子变化研究

摘要

背景 甲型流感病毒传染性强，重症感染病死率高。共信号分子是参与免疫应答的重要分子。探究甲型流感病毒感染后肺病毒载量与共信号分子的变化特点及相关性可为病毒感染后的治疗提供参考依据。目的 探究甲型流感病毒A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8株)感染小鼠肺病毒载量和共信号分子的变化特点及相关性。方法72只7周龄BALB/c小鼠随机分为高剂量病毒组(108 TCID50/mL,50μL/只，32只)、低剂量病毒组(104 TCID50/mL,50μL/只，32只)和对照组(PBS,50μL/只，8只)，三组分别于感染后24 h、48 h、72 h和96 h每个时间点每组各处死8只、8只、2只小鼠；解剖取左肺行HE染色，实时定量逆转录PCR (qRT-PCR)检测肺病毒载量以及共信号分子CD28、CD226、ICOS、CTLA-4、TIGIT、PD-1 mRNA相对表达量。将高、低剂量病毒组所有病毒感染小鼠(n=64)肺病毒载量与共信号分子m RNA相对表达量行相关性分析。结果 感染后96 h内，高剂量病毒组相比低剂量病毒组小鼠肺损伤较重，且共刺激分子CD28、CD226、ICOS mRNA相对表达量均减少(P均<0.05)。高剂量病毒组小鼠感染后24 h PD-1 mRNA相对表达量增加(P<0.01)，感染后48 h CTLA-4m RNA相对表达量增加(P<0.01)且病毒复制达到峰值。低剂量病毒组小鼠感染后72 h PD-1 mRNA相对表达量增加(P<0.05)且病毒复制达到峰值，感染后96 h CTLA-4 mRNA相对表达量增加(P<0.01)。病毒感染小鼠(n=64)肺病毒载量与PD-1 mRNA相对表达量存在正相关关系(r=0.540,P<0.001)，与CD226 mRNA相对表达量存在负相关关系(r=-0.340,P=0.006)。结论 甲型流感病毒感染小鼠肺组织中CTLA-4、PD-1 mRNA相对表达量增加等现象的早期出现可能提示小鼠感染的重症化。肺组织中的PD-1和CD226可能是与肺病毒载量相关的共信号分子靶点。

关键词

甲型流感病毒 / 病毒性肺炎 / 共信号分子 / 共刺激分子 / 共抑制分子

基金资助

国家重点研发计划(2017YFC1200802)