1株悬浮培养的Vero细胞驯化及其生物学特性研究

摘要

目的 将贴壁培养的Vero细胞驯化成悬浮培养细胞，并对其生物学特性进行研究。方法 采用无血清培养和“摇床适应法”对细胞进行培养优化，对其进行成瘤性、短串联重复序列（short tandem repeat,STR）分析、透射电子显微镜形态，以及对流感病毒敏感性检测。结果 成功建立悬浮细胞系Vero-S,Vero-S细胞生长期在24～72 h，平台期在108～144h之间，衰退期在144h以后，细胞PDT为36 h，细胞密度在14.01～14.88×10～8个/L之间，细胞平均圆度在0.73～0.75之间，细胞直径在12.12～14.44μm之间。Vero-S细胞在裸鼠皮下形成肿瘤，而悬浮培养前的Vero细胞不具有成瘤性；STR显示为猴源细胞系；电镜下细胞结构完整；Vero-S细胞对流感病毒感染不敏感。结论 悬浮细胞系Vero-S细胞的生长经历与贴壁细胞类似的生长期、平台期、衰退期，且细胞大小均一，建立的悬浮培养基能够支持Vero-S细胞高密度生长。STR结果表明悬浮Vero细胞具有完全的遗传稳定性，透射电镜下与贴壁Vero细胞无明显区别。为细胞悬浮驯化培养技术提供参考价值，并可用于细胞致肿瘤的机理研究。

关键词

Vero细胞 / 细胞悬浮驯化技术 / 成瘤性 / 病毒敏感性

基金资助

云南省重大科技专项基金资助项目（202302AA310002）;; 云南省基础研究专项基金资助项目（202301AU070048）;; 中国医学科学院医学与健康科技创新工程基金资助项目（2021-I2M-1-043）;; 协和实验室建设专项-基于大人群队列探索呼吸共病共性机制和干预手段研究基金资助项目（2023-I2M-2-001）