1株悬浮培养的Vero细胞驯化及其生物学特性研究

摘要

目的 将贴壁培养的Vero细胞驯化成悬浮培养细胞，并对其生物学特性进行研究。方法 采用无血清培养和“摇床适应法”对细胞进行培养优化，对其进行成瘤性、短串联重复序列（short tandem repeat,STR）分析、透射电子显微镜形态，以及对流感病毒敏感性检测。结果 成功建立悬浮细胞系Vero-S,Vero-S细胞生长期在24～72 h，平台期在108～144h之间，衰退期在144h以后，细胞PDT为36 h，细胞密度在14.01～14.88×10～8个/L之间，细胞平均圆度在0.73～0.75之间，细胞直径在12.12～14.44μm之间。Vero-S细胞在裸鼠皮下形成肿瘤，而悬浮培养前的Vero细胞不具有成瘤性；STR显示为猴源细胞系；电镜下细胞结构完整；Vero-S细胞对流感病毒感染不敏感。结论 悬浮细胞系Vero-S细胞的生长经历与贴壁细胞类似的生长期、平台期、衰退期，且细胞大小均一，建立的悬浮培养基能够支持Vero-S细胞高密度生长。STR结果表明悬浮Vero细胞具有完全的遗传稳定性，透射电镜下与贴壁Vero细胞无明显区别。为细胞悬浮驯化培养技术提供参考价值，并可用于细胞致肿瘤的机理研究。

关键词

Vero细胞 / 细胞悬浮驯化技术 / 成瘤性 / 病毒敏感性