丙泊酚调节MPP+诱导的SH-SY5Y细胞线粒体氧化应激和凋亡

摘要

目的探讨不同浓度的丙泊酚（propofol, PPF）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（1-Methyl-4-phenylpyridinium,MPP+）诱导的帕金森（Parkinson's disease, PD）模型细胞氧化应激和凋亡的作用。方法 利用1 mM MPP+诱导人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y构建PD细胞模型。PPF处理组分别用10、20、40、80μM PPF在MPP+诱导前刺激SH-SY5Y细胞4 h。细胞计数法（cell counting kit-8,CCK-8）评估细胞增殖活力。2′，7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯（H2DCF-DA）荧光探针用于检测细胞中活性氧（reactive oxygen species,ROS）。试剂盒分别检测丙二醛（malondialdehyde,MDA）和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase,NADPH）氧化酶的水平。Western blot用于检测线粒体和细胞质中细胞色素c的蛋白表达以及细胞中Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达。流式细胞术分析细胞凋亡率。结果 MPP+诱导明显抑制SH-SY5Y细胞的增殖（P <0.001），促进细胞中ROS(P <0.001)、MDA(P <0.001)、NADPH氧化酶（P <0.01）、细胞质中细胞色素c的表达（P <0.01）并诱导细胞凋亡（P <0.001）以及促凋亡蛋白Bax和Cleaved caspase-3的表达（P <0.01），减少线粒体中细胞色素c的蛋白表达（P <0.01）和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达（P <0.01）。PPF预处理可缓解MPP+诱导引起的SH-SY5Y细胞增殖抑制以及氧化应激和凋亡的促进作用（P <0.001），且40μM和80μM对细胞的作用更为显著。结论 PPF预处理可缓解MMP+诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激，减少细胞凋亡。

关键词

帕金森 / 氧化应激 / 1-甲基-4-苯基吡啶离子 / 丙泊酚