CD147通过AIM2炎症小体介导宫颈癌细胞焦亡和增殖

摘要

目的 探讨跨膜蛋白CD147表达量变化对AIM2炎症小体介导的宫颈癌细胞焦亡及增殖的影响。方法 采用Western blot实验检测CD147在宫颈癌细胞SiHa(HPV+)、C33a(HPV-)和正常宫颈上皮细胞H8(HPV+)、HCer Epic(HPV-)中的表达水平；通过慢病毒转染SiHa细胞下调CD147的表达，根据不同处理分为SiHa组、阴性对照组（shCD147-NON）、敲低组1(shCD147-1)和敲低组2(shCD147-2)，通过Western blot、RT-qPCR和观察细胞绿色荧光表达验证转染效果；通过Western blot和RT-qPCR检测CD147和AIM2炎症小体相关因子AIM2、Caspase-1、IL-18、GSDMD蛋白和mRNA的表达；检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）释放度，荧光倒置显微镜下观察细胞的形态；CCK-8实验检测细胞的增殖能力；细胞克隆实验检测细胞集落形成能力。结果 Western blot结果显示，与HCerEpic细胞比较，SiHa细胞中CD147蛋白表达最高（P <0.05）;CD147低表达慢病毒有效下调了SiHa细胞CD147表达水平（P <0.05）;Western blot及RT-qPCR实验结果表明，与SiHa组相比，shCD147-1组和shCD147-2组AIM2、Caspase-1、IL-18、GSDMD蛋白和mRNA表达明显升高（P <0.05）；乳酸脱氢酶（LDH）释放实验显示，与SiHa组相比，shCD147组LDH释放度明显升高（P <0.05）；荧光倒置显微镜下显示，shCD147组出现肿胀和空泡化，表现出典型的细胞焦亡现象；与SiHa组相比，shCD147-1组和shCD147-2组细胞增殖能力和集落形成能力明显降低（P <0.05）。结论 CD147低表达有效上调宫颈癌SiHa细胞AIM2炎症相关因子的表达，诱发细胞焦亡，抑制细胞的增殖和克隆。

关键词

宫颈癌 / CD147 / AIM2炎症小体 / 细胞焦亡 / 增殖

基金资助

国家自然科学基金资助项目(82260516)