CEACAM1源性荧光多肽底物Site 84对MMP-2、-7、-9、-12酶活性检测的研究

摘要

目的 探索CEACAM1源性多肽合成的荧光底物Site 84对MMP-2,-7,-9,-12酶活性的检测，并进一步探索荧光多肽底物Site 84在区分同属于MMPs明胶酶谱中MMP-2和MMP-9的应用。方法 采用荧光酶学法观察荧光多肽底物Site 84对MMP-2,-7,-9,-12酶活性的检测；进一步观察底物Site 84对明胶酶谱中MMP-2和MMP-9酶活性的敏感性和特异性；获得底物Site 84与MMP-2的酶促反应的动力学参数Km、Kcat。结果 以Site 84为底物，获得MMP-12、-7、-2的酶活力曲线，但未获得MMP-9的酶活力曲线；此外，以Site 84为底物，可特异性检测明胶酶谱中MMP-2的酶活性，其可检测低浓度（0.6μM）MMP-2的酶活性，然而对高浓度（6μM）MMP-9未见明显酶促反应；最后，MMP-2和底物Site 84的酶促反应动力学参数：Km=315μM,Kcat/Km=2 565/MS。结论 以CEACAM1源性底物Site 84作为新型的荧光多肽底物，可获得MMP-12、-7、-2的酶活力曲线，且可特异性检测MMPs明胶酶谱中MMP-2的酶活性。

关键词

Site 84 / 荧光多肽底物 / 酶活性 / 明胶酶 / CEACAM1源性

基金资助

国家自然科学基金（82360077）; 云南省基础研究计划昆医联合专项-面上项目（202201AY070001-082）;云南省基础研究计划青年项目（202201AU070063）; 昆明医科大学第一附属医院“535”高层次人才（2024535Q03）