丹参酮Ⅰ调控Wnt/β-catenin信号通路缓解大鼠脓毒症相关急性肾损伤

摘要

目的 探讨丹参酮Ⅰ（tanshinoneⅠ，TanⅠ）调节Wnt/β-catenin信号通路对脓毒症相关急性肾损伤（sepsis associated acute kidney injury,SA-AKI）大鼠的作用。方法 将Sprague Dawley大鼠随机分为Sham、SAAKI、SA-AKI+5 mg/kg TanⅠ、SA-AKI+10 mg/kg TanⅠ、SA-AKI+15 mg/kg TanⅠ（SA-AKI+TanⅠ）、SA-AKI+盐霉素钠（Wnt信号抑制剂，salinomycin sodium,SS,SA-AKI+SS组）、SA-AKI+SS+TanⅠ、SA-AKI+Wnt信号激活剂（laduviglusib,LG,SA-AKI+LG组）、SA-AKI+LG+TanⅠ，每组8只（含每组2只备用）。利用盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture,CLP）诱导大鼠SA-AKI模型，TanⅠ、SS和LG经腹腔注射至大鼠。苏木精-伊红和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法染色观察大鼠肾脏组织病理损伤，酶联免疫吸附实验检测中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL）、IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α血清浓度，肌酐（Creatinine,Cre）和血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）试剂盒检测Cre和BUN血清浓度。Western blot和免疫荧光染色检测Wnt1、GSK3β和β-catenin的表达及荧光强度。结果 10 mg/kg和15 mg/kg的TanⅠ可明显减轻SA-AKI大鼠肾脏损伤（P <0.05），抑制SA-AKI标志物NGAL、Cre和BUN和炎性细胞因子水平（P <0.05），减少细胞凋亡，抑制Wnt1、GSK3β并促进β-catenin表达（P <0.05）。5 mg/kg TanⅠ对大鼠SA-AKI具有一定保护作用，但与Sham组比较，无统计学差异（P> 0.05）。SS处理可减弱CLP诱导的大鼠肾损伤和炎性细胞因子的产生（P <0.05）,LG处理进一步加剧了CLP诱导的大鼠肾损伤（P <0.05）。TanⅠ可逆转LG对SA-AKI大鼠肾损伤的促进作用（P <0.05）。结论 TanⅠ通过抑制Wnt/β-catenin信号通路，对CLP诱导的大鼠SA-AKI具有保护作用。

关键词

脓毒症相关急性肾损伤 / 丹参酮Ⅰ / Wnt信号通路 / 肾功能 / 炎性细胞因子