槲皮素对BMSCs成骨分化的影响及作用机制

摘要

目的 探究槲皮素对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）成骨分化的影响及其作用机制。方法 将BMSCs分为空白对照组（Control）和槲皮素（Quercetin）低剂量组（4.8 mL/kg）、中剂量组（9.6 mL/kg）、高剂量组（19.2 mL/kg）分别用含药血清进行干预，而阳性对照组用成骨分化培养基（Osteogenic differentiation medium）处理，采用流式细胞仪分析细胞周期，MTT法评估细胞增殖水平，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）检测试剂盒测定细胞活性，茜素红染色观察钙化结节形成。通过Real-time PCR和Western Blot检测β-连环蛋白（β-catenin）及成骨分化关键因子Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)和骨钙素（osteocalcin,OCN）的表达水平。结果 与对照组相比，槲皮素含药血清促进BMSCs增殖（P=0.000 205,P=0.000 063），并增强成骨分化后的钙结节形成，成骨活性和ALP活性。Western Blot和PCR结果显示，槲皮素调成骨分化过程中β-catenin (P <0.000 1)、RUNX2 (P <0.000 1)及OCN (P <0.000 1)的mRNA和蛋白表达。结论 槲皮素能有效促进BMSCs成骨分化，其机制可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路，上调成骨相关转录因子RUNX2的表达来实现。

关键词

槲皮素 / 骨髓间充质干细胞 / 成骨分化 / Wnt/β-catenin

基金资助

云南省科技厅中医联合专项-青年项目（202101AZ070001-132）;(202101AZ070001-130);(202101AZ070001-319); 昆明市卫生健康委员会卫生科研课题项目（2022-16-01-008）