miR-34a对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的影响

摘要

目的 探讨miR-34a对人牙周膜干细胞增殖和成骨分化的影响。方法 收集20颗因正畸治疗需要拔除的健康牙齿，体外分离培养人牙周膜干细胞（hPDLSCs），构建miR-34a的模拟物转染至hPDLSCs中，实验分组为mimics组（miR-34a过表达组）、mimics-NC组（空载组）。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检验转染效率、CCK-8检测hPDLSCs在转染后的增殖能力。诱导转染miR-34a的hPDLSCs成骨分化，收集成骨分化后第0 d、14 d hPDLSCs,qRT-PCR法检测成骨标志Runt相关转录因子2(Runx2)的表达水平、Western blot法检测Runx2相关蛋白的表达水平、茜素红染色显示矿化结节形成情况。结果 mimics组的miR-34a表达水平显著高于mimics-NC组（P <0.05）。第1～5天，mimics组、mimics-NC组的增殖率差异无统计学意义（P> 0.05）；第5～11天，mimics组增殖率明显低于mimics-NC组，差异有统计学意义（P <0.05）。转染miR-34a的hPDLSCs经过成骨诱导后，在第0天和第14天mimics组Runx2的mRNA表达水平均高于mimics-NC组（P <0.05）,mimics组Runx2蛋白表达水平也高于mimics-NC组（P <0.05），成骨诱导14 d后mimics组矿化结节多于mimics-NC组。结论 在体外条件下，miR-34a抑制hPDLSCs的增殖活性，促进人牙周膜干细胞的成骨分化。

关键词

miR-34a / 人牙周膜干细胞 / 增殖 / 成骨

基金资助

云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金（202301AY070001-010）; 云南省口腔疾病临床医学研究中心青年科研基金（2022QN006）; 云南省大学生创新创业训练计划基金（2023JXD061）; 昆明医科大学大学生创新性实验基金（2022JXD196,2024CYD457）