基于巨噬细胞自噬探讨川芎嗪对脊髓损伤修复的分子机制

摘要

目的 研究川芎嗪在脊髓损伤大鼠模型中的脊髓修复效果及其分子作用机制。方法 Allen's法构建脊髓损伤模型大鼠，大鼠后肢痉挛、尾巴扭动且BBB评分为0分，表明造模成功。大鼠分为假手术组、模型组、川芎嗪低、高剂量组，每组10只。川芎嗪低、高剂量组分别腹腔注射川芎嗪（150、200 mg/kg），正常组和模型组等剂量生理盐水，每日1次，持续28 d。于术后不同时间点观察大鼠后肢运动功能并进行BBB评分；HE和Nissl染色观察脊髓组织病理学变化及神经元形态；ELISA检测脊髓组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）表达水平；TUNEL染色评估脊髓神经元凋亡状态；Western Blot检测脊髓组织LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Bax、Bcl-2蛋白表达水平；电镜观察脊髓巨噬细胞中自噬体形成；免疫荧光法检测脊髓巨噬细胞中LC3Ⅱ的蛋白表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠后肢功能、脊髓组织形态学受损（P<0.05），脊髓组织SOD、细胞凋亡、LC3Ⅱ/Ⅰ、Bcl-2蛋白表达、巨噬细胞中自噬体数量及LC3Ⅱ蛋白表达水平降低，MDA、Bax、Bax/Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）。与模型组比较，川芎嗪低、高剂量组大鼠后肢功能、脊髓组织形态学均有改善（P<0.05），脊髓组织SOD、细胞凋亡、LC3Ⅱ/Ⅰ、Bcl-2蛋白表达、巨噬细胞中自噬体数量及LC3Ⅱ蛋白表达水平升高，MDA、Bax、Bax/Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05）；且川芎嗪的干预效果呈剂量依赖性。结论 川芎嗪可以有效修复大鼠脊髓损伤，其分子机制可能与激活脊髓巨噬细胞自噬，抑制神经元凋亡相关。

关键词

川芎嗪 / 脊髓损伤 / 巨噬细胞 / 自噬 / 细胞凋亡