APOE4调控LRP1对Aβ_25-35诱导的星形胶质细胞氧化应激和炎症反应的作用

摘要

目的 探讨载脂蛋白E4（apolipoprotein E4,APOE4）调控脂蛋白受体相关蛋白1（lipoprotein receptorrelated protein-1,LRP1）对β-淀粉样蛋白（amyloid β-protein,Aβ）_25-35诱导的星形胶质细胞氧化应激和炎症反应的作用。方法 在细胞中转染sh-NC、sh-APOE4、sh-LRP1、pcDNA-NC和pcDNA-LRP1，利用10μM Aβ_25-35诱导人星形胶质细胞24 h构建阿尔兹海默病（Alzheimer's disease,AD）细胞模型，经Western blot、DCFH-DA荧光探针和MDA、SOD和GSH检测试剂盒、TNF-α、IL-6和IL-1β酶联免疫吸附试剂盒探讨APOE4和LRP1对Aβ_25-35诱导的星形胶质细胞氧化应激和炎症反应的作用。通过免疫共沉淀和Western blot实验检测APOE4与LRP1的蛋白-蛋白相互作用。结果 Aβ_25-35诱导上调APOE4表达（P<0.01），促进星形胶质细胞中ROS（P<0.001）、MDA（P<0.001）和炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平（P<0.001），抑制SOD、GSH和LRP1表达（P<0.001）。敲降APOE4或过表达LRP1可抑制Aβ_25-35诱导的细胞中ROS、氧化应激和炎性细胞因子（P<0.05）。APOE4通过蛋白-蛋白相互作用负调控LRP1蛋白表达。同时敲降APOE4和LRP1组细胞中ROS、MDA和炎性细胞因子浓度高于仅敲降APOE4组（P<0.05），抑制SOD和GSH浓度（P<0.001）。结论 敲降APOE4通过上调LRP1抑制Aβ_25-35诱导的星形胶质细胞的氧化应激和炎症反应。

关键词

阿尔兹海默病 / 星形胶质细胞 / Aβ / 氧化应激 / 炎症反应