细胞焦亡相关TLR4信号通路在光线性角化病向皮肤鳞癌进展中的表达

摘要

目的 探讨细胞焦亡相关TLR4信号通路是否影响光线性角化病（actinic keratosis,AK）向皮肤鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma,SCC）恶性转化。方法 收集昆明医科大学第一附属医院2020年8月至2021年8月AK、SCC患者病变组织样本各6例及健康受试者正常皮肤组织5例作为对照。采用定量PCR和Western blot检测TLR4信号通路相关因子TLR4、CPB1、NLRP3、IL-1β及IL-18的mRNA及蛋白表达水平；TLR4/TUNEL免疫荧光双染用于检测各组织中TLR4的表达及细胞焦亡水平。通过Western blot检测正常角质形成细胞系HaCaT及皮肤鳞状细胞癌细胞系A431、SCL-1中焦亡核心蛋白（pro-caspase-1、cleaved caspase-1/p20、GSDMD、cleaved N-terminal GSDMD）及TLR4的表达差异。结果 定量PCR和Western blot结果显示，SCC组织中TLR4、CPB1、NLRP3、IL-1β及IL-18的mRNA及蛋白表达水平均显著高于AK和正常皮肤组织（P<0.05）。TLR4/TUNEL免疫荧光双染结果显示，从正常皮肤到AK再到SCC,TLR4表达及细胞焦亡水平呈逐步升高趋势（P<0.05）。此外，SCL-1细胞中pro-caspase-1、cleaved caspase-1/p20、cleaved N-terminal GSDMD及TLR4的表达升高（P<0.05），而A431细胞中仅TLR4上调（P<0.05），其他焦亡核心蛋白较HaCaT细胞下降（P<0.05）。结论 TLR4信号通路在AK及SCC中表达逐步升高，且不同皮肤鳞癌细胞系中该通路的活化状态存在差异。

关键词

皮肤鳞状细胞癌 / 光线性角化病 / 细胞焦亡 / TLR4

基金资助

国家自然科学基金（82160598,81660518）; 云南省科技厅-昆明医科大学基础研究联合专项基金（202401AY070001-035）