抑制lncRNA H19表达对血管性痴呆模型神经炎症及认知功能的影响

摘要

目的 探讨长非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)H19（简称H19）对血管性痴呆（vascular dementia,VD）模型神经炎症及认知功能的作用。方法 采用双侧颈总动脉闭塞构建VD小鼠模型，48只小鼠随机均分为假手术组、模型组、NC组和shRNA-H19组，其中假手术组不结扎。造模成功后，NC组和shRNAH19组小鼠脑内分别注射AAV2/1-shRNA-空载、AAV2/1-shRNA-H19。水迷宫法观察小鼠认知水平；HE和Nissl染色观察海马CA1区病理及神经元损伤情况；TUNEL染色检测神经元凋亡；酶联免疫吸附测定（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）法检测海马组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-6水平；免疫荧光染色检测海马CA1区离子钙结合衔接分子1(ionized caciumbinding adapter molecule-1,Iba-1)蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）和（或）Western blot法检测海马组织H19、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)蛋白和（或）mRNA表达。结果 与模型组比较，shRNA-H19组小鼠认知能力升高（P<0.05），海马CA1区病理及神经元损伤减轻，海马组织Bcl-2水平升高，神经元凋亡率、H19、TNF-α、IL-1β、IL-6、Iba-1、cleaved Caspase-3、TLR4、NF-κB p-p65/NF-κB p65水平均降低（P<0.05）；而NC组上述指标均无显著性差异（P >0.05）。结论 抑制海马组织H19表达可改善VD小鼠神经炎症和认知功能，抑制海马CA1区神经元凋亡及小胶质细胞浸润，其机制可能与下调TLR4/NF-κB p65通路相关。

关键词

血管性痴呆 / 长非编码RNA H19 / 神经元凋亡 / 神经炎症 / TLR4/NF-κB p65通路 / 小鼠