AKR1C3通过PD1/PD-L1信号通路对乳腺癌细胞恶性生物学行为的干预作用

摘要

目的 探索酮还原酶家族1成员C3(aldo-keto reductase family 1 member C3,AKR1C3)对乳腺癌恶性细胞生物学行为的干预作用及对程序性细胞死亡蛋白/程序性死亡-配体1(programmed cell death protein1/programmed death-ligand1,PD-1/PD-L)通路的影响。方法 把MCF-7人乳腺癌细胞中NC组和AKR1C3组分别转染空质粒和AKR1C3质粒，采用MTT法检测转染后24 h、48 h、72 h细胞活力；采用流式细胞技术测定各组细胞的存活率以及早期、晚期凋亡比例；通过Transwell实验对各组细胞的迁移和侵袭能力进行检测；通过Western blot检测各组细胞PD-1、PD-L1、蛋白激酶B(protein kinase b,AKT)蛋白表达水平。使用C57BL/6小鼠构建荷瘤模型，将采用人乳腺癌MCF-7细胞转染NC质粒和AKR1C3质粒进行细胞荷瘤，每3 d测量瘤体积，持续21 d，绘制两组小鼠肿瘤生长曲线，并于实验终点测量肿瘤质量。结果 相较于NC组，AKR1C3组细胞活力降低（P<0.05），并且具有时间依赖效应（P<0.05），迁移和侵袭能力降低（P<0.05），早期凋亡和晚期凋亡比例升高（P<0.05）,PD-1、PD-L1、AKT蛋白表达水平降低（P<0.05）。动物实验表明，AKR1C3组小鼠肿瘤体积降低，肿瘤质量下降（P<0.05）。结论 AKR1C3可以抑制人乳腺癌细胞恶性生物学行为，抑制PD-1/PDL1信号通路蛋白表达。

关键词

AKR1C3 / 人乳腺癌 / 凋亡 / 迁移 / PD-1/PD-L1通路 / 侵袭 / AKT / PPR5